[发明专利]基于无底物、非标记的电催化放大生物传感器检测肺癌细胞中microRNA的方法

权利要求书

1.一种无底物、非标记的电催化放大生物传感器的制备方法，其特征是，

含铁富氮碳纳米管的制备：将双氰胺与亚铁盐在惰性气体氛围下加热至490~510℃自组装形成前体，将前体在惰性气体氛围下加热至890~910℃，煅烧后获得含铁富氮碳纳米管；

将含铁富氮碳纳米管和金纳米颗粒修饰至玻碳电极获得AuNP/FeCN/GCE电极，具体过程为，先将含铁富氮碳纳米管溶液滴加至玻碳电极表面，干燥后，再向玻碳电极表面滴加金纳米颗粒溶液；

然后通过金-硫键将硫醇化的捕获探针固定在AuNP/FeCN/GCE电极，所述捕获探针为能够与目标microRNA杂交的单链DNA。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征是，自组装的时间为1.5~2.5小时。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述前体在惰性气体氛围下加热至890~910℃的升温速率为10±0.5℃。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征是，捕获探针固定在AuNP/FeCN/GCE电极后，采用6-巯基己醇封闭未修饰的位点。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述捕获探针由5’到 3’的序列为：

CTC GGG GCA GCT CAG TAC AGG A-SH。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征是，所述目标microRNA由5’到 3’的序列为：

UCC UGU ACU GAG CUG CCC CGA G。

7.一种权利要求1~6任一所述的制备方法获得的生物传感器。

8.一种检测肺癌细胞中microRNA的试剂盒，其特征是，包括权利要求7所述的生物传感器、poly A 聚合酶、富T辅助探针、硫堇。

9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征是，富T辅助探针5’到 3’的序列为：TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT。