[发明专利]一种同时检测维生素D和维生素K的方法

说明书

本发明属于检测技术领域，尤其涉及一种同时检测维生素D和维生素K的方法。本发明提供了一种同时检测维生素D和维生素K的方法，包括以下步骤：a)采用正己烷和无水乙醇的混合溶液对待测物进行维生素D3和维生素K2的提取，b)采用液相色谱法进行所述待测物维生素D3和维生素K2的检测，得到液相色谱数据，根据维生素D3和维生素K2的液相色谱标准工作曲线，得到所述待测物维生素D3和维生素K2的含量。实验结果表明，本发明方法能够同时检测维生素D3和维生素K2，检测的准确率高，采用本发明方法进行维生素D3和维生素K2的检测，每批样品仅需8.5h，大大提高了检测效率。

技术领域

本发明属于检测技术领域，尤其涉及一种同时检测维生素D和维生素K的方法。

背景技术

目前，维生素D和维生素K是分开进行检测的，对于维生素D3的检测，样品处理需要4h，且操作复杂繁琐，包括样品皂化、提取、浓缩、洗涤、定容和过滤，样品上机时间为6h，检测一批样品的维生素D3共需10h；对于维生素K2的检测，样品处理需要1.5h，样品上机时间为7h，检测一批样品的维生素K2共需8.5h；完成一批样品的维生素D3和维生素K2检测，共需要18.5h，不利于产品的高效、快速检测。并且，在检测样品维生素D3和维生素K2中，处理过程需要使用大量氢氧化钾、石油醚、乙酸乙酯等对人体伤害较大的试剂，不利于检测人员的健康。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种同时检测维生素D和维生素K的方法，用于解决现有技术检测维生素D3和维生素K2操作过程繁琐、时间长、不利于检测人员健康的问题。

本发明的具体技术方案如下：

一种同时检测维生素D和维生素K的方法，包括以下步骤：

a)采用正己烷和无水乙醇的混合溶液对待测物进行维生素D3和维生素K2的提取，

b)采用液相色谱法进行所述待测物维生素D3和维生素K2的检测，得到液相色谱数据，根据维生素D3和维生素K2的液相色谱标准工作曲线，得到所述待测物维生素D3和维生素K2的含量。

本发明中，采用正己烷和无水乙醇的混合溶液对待测物进行维生素D3和维生素K2的提取以进行样品处理，避免采用毒性高的溶剂，有利于检测人员的健康，实验结果表明，本发明方法能够同时检测维生素D3和维生素K2，检测的准确率高，采用本发明方法进行维生素D3和维生素K2的检测，每批样品仅需8.5h，大大提高了检测效率。

优选的，所述待测物为钙维生素D维生素K软胶囊。

优选的，所述正己烷和无水乙醇的混合溶液中正己醇和无水乙醇的体积比为(10～20)：(80～90)。

更优选的，正己烷和无水乙醇的混合溶液中正己醇和无水乙醇的体积比为20：80。

优选的，所述液相色谱标准工作曲线中维生素D3的浓度为0.128μg/ml～1.28μg/ml；

所述液相色谱标准工作曲线中维生素K2的浓度为0.513μg/ml～5.13μg/ml。

优选的，所述液相色谱法的条件为：

色谱柱为C18色谱柱；

色谱柱柱温为30℃～50℃；

检测波长为264nm；

流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为95％甲醇-水溶液，所述流动相B为异丙醇；

流动相流速为0.5mL/min～1.5mL/min。

更优选的，色谱柱柱温为40℃；

流动相流速为1mL/min。