[发明专利]一种同时检测维生素D和维生素K的方法

权利要求书

1.一种同时检测维生素D3和维生素K2的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a）采用正己烷和无水乙醇的混合溶液对待测物进行维生素D3和维生素K2的超声提取；

所述超声提取的频率为20 KHz~60 KHz，所述超声提取的温度为55℃~65℃，所述超声提取的时间为25 min~35 min；

所述正己烷和无水乙醇的混合溶液中正己烷和无水乙醇的体积比为10~20：80~90；

b）采用液相色谱法进行所述待测物维生素D3和维生素K2的检测，得到液相色谱数据，根据维生素D3和维生素K2的液相色谱标准工作曲线，得到所述待测物维生素D3和维生素K2的含量；

所述待测物为钙维生素D维生素K软胶囊；

所述液相色谱法的条件为：

色谱柱为C18色谱柱；

色谱柱柱温为30℃~50℃；

检测波长为264 nm；

流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为95%甲醇-水溶液，所述流动相B为异丙醇；

流动相流速为0.5 mL/min~1.5 mL/min；

所述液相色谱法采用梯度洗脱；

0.01~20.00 min，流动相A和流动相B的体积比为98：2；

20.01~38.00 min，流动相A和流动相B的体积比为50：50；

38.01~42.00 min，流动相A和流动相B的体积比为0：100；

42.01~45.00 min，流动相A和流动相B的体积比为50：50；

45.01~53.00 min，流动相A和流动相B的体积比为98：2。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述液相色谱标准工作曲线中维生素D3的浓度为0.128 μg/ml~1.28 μg/ml；

所述液相色谱标准工作曲线中维生素K2的浓度为0.513 μg/ml~5.13 μg/ml。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述C18色谱柱的长度为250 mm，所述C18色谱柱的内径为4.6 mm，所述C18色谱柱的填料粒径为5 μm。