[发明专利]一种通过基因编辑技术培育抗白叶枯病水稻的方法

权利要求书

1.一种通过基因编辑显著提高水稻抗白叶枯病水平的方法，其特征在于：利用CRISPR/Cas9基因编辑方法介导的同源重组修复方法，将AvrXa23结合位点的核酸片段替换到对白叶枯感病的栽培稻水稻中xa23基因上游的启动子区，赋予xa23基因在遭遇白叶枯病菌侵染时能激活表达的能力，从而提高水稻对白叶枯的抗性水平；所述的AvrXa23结合位点的核酸片段序列为EBE_AvrXa23序列，其中所述EBE_AvrXa23的序列为SEQ ID NO:1所示序列：TCCGAAACATCTTCCTCCCGCATCACTA；其中CRISPER/Cas9基因编辑靶序列为：SEQ ID NO:2所示序列：AGTAGCTGATGTGAAGGGCGCGG和/或SEQ ID NO:3所示序列：ATGTTAGTGAGGCGGAAGGAAGG；并且所使用的打靶载体采用双靶点的设计，以实现对水稻的xa23基因上游启动子区的如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示序列的2个靶位点进行同时切割。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：基因编辑中所使用的供体载体中待替换的AvrXa23结合位点的核酸片段序列前设计有酶切位点。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的酶切位点为BamHI酶切位点。

4.如权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于：所述水稻是亚洲栽培稻和非洲栽培稻。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于：所述水稻是亚洲栽培稻的籼稻品种。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述水稻是超优千号、湘两优900、隆两优1988、深两优136、晶两优华占、内香6优9号、泸优727及蜀优217。

7.如权利要求5所述的方法，其特征在于：所述水稻是杂交稻组合超优千号、湘两优900、隆两优1988、深两优136、晶两优华占、内香6优9号、泸优727及蜀优217的亲本。