[发明专利]一种用于防治梨树根瘤病的微生物复合菌剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种用于防治梨树根瘤病的微生物复合菌剂，该微生物复合菌剂中的各组分的重量百分比组分含量包括：复合腐植酸10％‑25％、土壤悬液5％‑20％、硫酸铜5％‑15％、杀菌活性物质粗提液3％‑10％、氮酮3％‑8％、井岗霉素7％‑8％、甘油5％‑10％、青霉素1％‑3％、植枯灵1％‑3％、ABT生根粉0.01％‑0.1％，余量为水。本发明制成的微生物复合菌剂，配比合理，制作方法简单，通过多种组分以及根瘤病菌的相互作用，可以杀灭梨树根瘤病菌，改良土壤结构，提高植物生长所需养分，治疗效果显著，可有效的促进梨树生长发育，提高梨树的抵抗力，减少农药化肥的使用，提高农产品的产量与品质，具有很高的经济效益、生态效益和社会效益，应用前途广阔。

技术领域

本发明涉及生物农药的制备技术领域，具体为一种用于防治梨树根瘤病的微生物复合菌剂及其制备方法。

背景技术

梨树的根瘤病也称根癌病，是一种细菌性病害，主要危害梨树的根颈部位，也危害根、枝，主要以病残体和芽孢在病残体或土壤中越冬，传播途径广泛，雨水、风、昆虫、人为传播都有，是梨树最重要的枝干病害，近几年发病越来越重，其不仅影响了梨树的正常生长，而且还影响了产品的质量、产量，甚至会造成梨树死亡，应引进广大果农的重视。

因此，针对梨树根瘤病防治的现实需求，开发一种应用方便、高效安全、兼具预防和治疗梨树根瘤病的微生物复合菌剂具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于防治梨树根瘤病的微生物复合菌剂及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：一种用于防治梨树根瘤病的微生物复合菌剂，所述微生物复合菌剂中的各组分的重量百分比组分含量如下：

复合腐植酸10％-25％、土壤悬液5％-20％、硫酸铜5％-15％、杀菌活性物质粗提液3％-10％、氮酮3％-8％、井岗霉素7％-8％、甘油5％-10％、青霉素1％-3％、植枯灵1％-3％、ABT生根粉0.01％-0.1％，余量为水。

进一步的，所述的复合腐殖酸是利用玉米秸秆、麦秸、稻秸等多种绿色农作物的茎杆为原料进行粉碎、混料处理后，进行灭菌、发酵、在旋转大罐内进行固体发酵，再进行分离提取，制成成品。

进一步的，所述的土壤悬液是通过选择肥沃的土壤，铲去表土层，取土壤，备用，将铲去表土层的土壤放入无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中，置摇床振荡3-8min使土样均匀分散在稀释液中成为土壤悬液。

进一步的，所述的杀菌活性物质粗提液中含有杀菌活性物质为HSAF。

进一步的，所述杀菌活性物质粗提液的制备方法包括以下步骤：

1)、取产酶溶杆菌OH11菌株，划线接种至LB固体平板上，在28℃条件下活化培养24-36h；

2)、利用灭菌牙签挑取一个单菌落接种到一个含有LB液体培养基的三角瓶中，28℃条件下震荡培养16-24h，震荡频率为150r/min；

3)、将上述步骤2)所得的种子液以体积比为2％的比例接种到10％TSB培养基中进行发酵，发酵温度为28℃，以每分钟通过发酵液的空气体积与发酵液体积之比为0.5-2.0:1的方式，进行发酵通气，搅拌速度为80-160r/min，发酵时间为72h；

4)、将发酵液利用双层纱布过滤，煮沸10min，然后6000r/min离心15分钟取上清，用HPLC测定发酵上清中HSAF含量，并利用纯水将HSAF的浓度调整到80mg/L，得到杀菌活性物质粗提液。

本发明还公开了一种上述的微生物复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：