[发明专利]一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的量子点荧光猝灭免疫层析试纸条在审
申请号: | 201811481805.7 | 申请日: | 2018-12-05 |
公开(公告)号: | CN111272996A | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 张燕;沙志聪;生威;刘冰 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N33/558;G01N33/58 |
代理公司: | 天津合志慧知识产权代理事务所(普通合伙) 12219 | 代理人: | 张勇 |
地址: | 300457 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 黄曲霉 毒素 b1 曲霉 量子 荧光 免疫 层析 试纸 | ||
1.一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的量子点荧光猝灭免疫层析试纸条,包括作为支撑体的PVC背板以及固定在支撑体上的的固定层,固定层从检测端开始依次为样品垫、结合垫、层析垫、吸水垫,其特征在于,先将层析垫固定在PVC背板上,再将吸水垫与层析垫有5mm的重合后固定在PVC背板上,然后结合垫一半长度与层析垫重合,另一半固定在PVC背板上,最后将样品垫与固定在PVC背板上的结合垫完全重合后固定在PVC背板上。
2.根据权利要求1所述的一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的量子点荧光猝灭免疫层析试纸条,其特征在于,所述的层析垫上设有质控线、检测线一以及检测线二,质控线位置处为量子点-鸡卵白蛋白结合物,检测线一位置处为量子点-鸡卵白蛋白结合物和黄曲霉毒素B1抗原的混合物,检测线二位置处为量子点-鸡卵白蛋白结合物和赭曲霉毒素A抗原的混合物,在层析垫上,以距离样品垫由近到远依次为检测线二、检测线一和质控线,分别作为试纸条的T2线、T1线和C线。
3.根据权利要求1所述的一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的量子点荧光猝灭免疫层析试纸条,其特征在于,所述的样品垫和结合垫均为玻璃纤维素膜,层析垫为硝酸纤维素膜,PVC背板为聚氯乙烯材料。
4.根据权利要求1所述的一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的量子点荧光猝灭免疫层析试纸条,其特征在于,用于同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A。
5.根据权利要求1所述的一种同时检测黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的量子点荧光猝灭免疫层析试纸条的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)纯化分别含有黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A抗体的血清,得到两种多克隆抗体;
(2)采用活化酯法制备两种物质的抗原;
(3)采用活化酯法制备量子点-鸡卵白蛋白结合物;
(4)用(1)的两种抗体分别与胶体金连接,制备得到两种物质的胶体金-抗体结合物;
(5)将适量步骤(3)制得的量子点-鸡卵白蛋白结合物,适量步骤(3)制得的量子点-鸡卵白蛋白结合物与适量步骤(2)制得的黄曲霉毒素B1抗原混合物,适量步骤(3)制得的量子点-鸡卵白蛋白结合物与适量步骤(2)制得的赭曲霉毒素A抗原混合物,分别包被在试纸条C、T1、T2位置处;
(6)各取适量步骤(4)制得的胶体金-抗体结合物,与样品稀释液混合后上样;
(7)将PVC背板、层析垫、吸水垫、结合垫、样品垫按顺序组装,制备得到所述试纸条。
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