[发明专利]一种酯化红曲的培养基的制备方法

说明书

本发明的一种酯化红曲的培养基的制备方法，属于生物工程技术领域。本发明以菜籽皮、菜籽粕和玉米粉为主要原料，通过试管斜面菌种的制备、三角瓶菌种的制备、生产用菌种的制备、准备发酵基料、拌种、打堆发酵、摊堆发酵、低温烘干的工艺步骤得到得酯化酶粗酶制剂，即为酯化红曲的培养基。本发明的一种酯化红曲的培养基的制备方法，可以提高红曲酯化力，工艺简单，成本低。

技术领域

本发明涉及一种酯化红曲的培养基的制备方法，属于生物工程技术领域。

背景技术

酯化酶是脂肪酶和酯酶的统称，可以催化多种酸和醇的反应生成酯类。酯化酶技术就是利用酯化酶将酸与醇酶促生成酯，作为增香、调香剂，可以避免因使用化学香精类物质对人体的危害。酯化酶在白酒生产中的应用主要是合成各种酯类，为方便工业化生产，多制成粗酶制剂应用于生产中。酯化红曲是高酯化力曲霉为主的生物酶和活菌体的生态复合菌制剂，可以加速白酒发酵过程中酯的形成，缩短发酵周期，成为提高白酒中酯的含量成为关键。

菜籽皮是菜籽加工中的主要副产品之一，经试验表明，菜籽皮干基蛋白质含量为12.9％，粗纤维含量为48.7％，脂肪含量为8.4％，灰分4％，总糖2％，其中主要含木糖和树胶酵糖。菜籽皮中含有大量多酚类物质，具有抗氧化作用，同时影响其氨基酸含量，酶活性等，是菜籽皮很重要的营养物质。菜籽粕是菜籽榨油后的主要副产物，是一种重要的饲料蛋白来源，其粗蛋白含量在35％-40％，氨基酸组成均衡；碳水化合物含量大于20％，大部分为粗纤维和戊聚糖；矿物质含量丰富。菜籽种皮一般占整籽比例为16％，菜籽榨油后菜籽粕的得率约为30％，将菜耔皮和菜籽粕收集起来其数量是巨大的，对其进行综合利用具有十分重要的意义。

但是现有的酯化红曲的培养基，红曲酯化力低，工艺复杂，成本高。

发明内容

本发明提供的一种酯化红曲的培养基的制备方法，可以提高红曲酯化力，工艺简单，成本低。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种酯化红曲的培养基的制备方法，为下述步骤：

(1)试管斜面菌种的制备，将分装有改良察氏琼脂的试管在高温高压下灭菌，在无菌条件下，将实验室筛选诱变获得的烟灰色红曲霉HN215-6接种于试管中，在30～32℃培养48～52h，得到第一试管斜面菌种；

(2)三角瓶菌种的制备，在500mL的三角瓶中加入大米培养基，在无菌条件下，接入1～5环步骤(1)中的第一试管斜面菌种，于30～32℃、200rpm条件下摇瓶培养48h～52h，得到第一三角瓶菌种；

(3)生产用菌种的制备，向灭菌后的500L种子罐中加入大米培养基，在120～125℃温度下灭菌30min，待种子罐冷却至35～40℃时，按种子罐中物料体积总量的0.10～0.15％接入步骤(2)中的第一三角瓶菌种，在转速240rpm、温度32～34℃、灌压0.05～0.07Mpa、无菌空气流量8～10m³/h的条件下，培养48～72h得第一生产用菌种；

(4)发酵用基料的准备，将菜籽皮、菜籽粕和玉米粉投入蒸料罐内，旋转混合时间10～15min，向蒸料罐内加水，料水质量比为1：0.4，然后在115-130℃温度下蒸料30min，在常压和温度为90℃环境下凉料，得基料，将基料从蒸料罐内放出，转入发酵池，基料温度冷却至35～40℃，得冷却后基料，将冷却后基料中加入步骤(3)中的第一生产用菌种，按照每克基料的20～21mL第一生产用菌种来进行接种，混合拌种，按照每克基料加入0.1～0.12mL的乳酸来添加乳酸，然后温度维持32～35℃，得拌种基料；