[发明专利]一种酯化红曲的培养基的制备方法

权利要求书

1.一种酯化红曲的培养基的制备方法，其特征在于，为下述步骤：

(1)试管斜面菌种的制备，将分装有改良察氏琼脂的试管在高温高压下灭菌，在无菌条件下，将实验室筛选诱变获得的烟灰色红曲霉HN215-6接种于试管中，在30～32℃培养48～52h，得到第一试管斜面菌种；

(2)三角瓶菌种的制备，在500mL的三角瓶中加入大米培养基，在无菌条件下，接入1～5环步骤(1)中的第一试管斜面菌种，于30～32℃、200rpm条件下摇瓶培养48h～52h，得到第一三角瓶菌种；

(3)生产用菌种的制备，向灭菌后的500L种子罐中加入大米培养基，在120～125℃温度下灭菌30min，待种子罐冷却至35～40℃时，按种子罐中物料体积总量的0.10～0.15％接入步骤(2)中的第一三角瓶菌种，在转速240rpm、温度32～34℃、灌压0.05～0.07Mpa、无菌空气流量8～10m³/h的条件下，培养48～72h得第一生产用菌种；

(4)发酵用基料的准备，将菜籽皮、菜籽粕和玉米粉投入蒸料罐内，旋转混合时间10～15min，向蒸料罐内加水，料水质量比为1：0.4，然后在115-130℃温度下蒸料30min，在常压和温度为90℃环境下凉料，得基料，将基料从蒸料罐内放出，转入发酵池，基料温度冷却至35～40℃，得冷却后基料，将冷却后基料中加入步骤(3)中的第一生产用菌种，按照每克基料的20～21mL第一生产用菌种来进行接种，混合拌种，按照每克基料加入0.1～0.12mL的乳酸来添加乳酸，然后温度维持32～35℃，得拌种基料；

(5)发酵，将步骤(4)中的拌种基料堆厚40～50cm，表面覆以灭菌的麻袋，在室温下发酵培养10～15h，得发酵基料，当发酵基料的温度达到48～50℃时，摊薄发酵基料，摊薄至堆厚为15～20cm，在20～25℃下，通风维持内部温度为32～35℃，发酵培养3～5d，每天翻料一次，得发酵好的基料，将发酵好的基料在≤65℃温度下烘干至水分≤12％，得低温烘干基料；

(6)烘干破碎，将低温烘干基料粉碎，细度为100％过40目，得酯化酶粗酶制剂，即为酯化红曲的培养基；

其中，所述步骤(1)的察氏斜面培养基中各组分及含量分别为：NaNO₃0.3～0.35％、KH₂PO₄0.10～0.12％、MgSO₄0.05～0.07％、KCl0.05～0.07％、FeSO₄0.001～0.0015％、蔗糖3～3.2％、琼脂2～2.5％和水100ml，灭菌温度为115-130℃，压力为2-4个大气压下灭菌10-20min；

所述步骤(2)中灭菌温度为115-130℃，压力为2-4个大气压下灭菌15-30min，所述大米培养基中各组分及含量为大米粉0.5-1.5％和水100ml；

所述步骤(3)中大米培养基中各组分及含量为大米粉15～15.3Kg和水200L；

所述步骤(4)冷却后基料中各组分的含量为菜籽皮55～65％、菜籽粕10％～20％，玉米粉20～30％。