[发明专利]一种药物肺部代谢特征的体外评价方法

说明书

本发明提供了一种药物肺部代谢特征的体外评价方法，所述方法包括如下步骤：(1)制备肺亚细胞组织；(2)采用步骤(1)所得肺亚细胞组织分别配制阳性质控体系、阴性质控体系、对照组反应体系和试验组反应体系，孵育培养，离心取上清液；(3)分别检测步骤(2)所述阳性质控体系和阴性质控体系上清液中的阳性底物的母体含量，以及对照组反应体系和试验组反应体系上清液中的待测物的母体含量；所述阳性质控体系的阳性底物包括2‑氨基芴，4‑甲氧基‑1,8‑萘二甲酰亚胺，非那西丁或4‑甘薯黑疤霉二醇中的任一种或至少两种的组合。本发明的评价方法效果稳定，是针对肺部给药的完善的评价方法，为新药研发以及药物相互作用提供方法学支持。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种药物安全的评价方法，具体涉及一种药物肺部代谢特征的体外评价方法，尤其涉及吸入性药物的肺部代谢特征的体外评价方法。

背景技术

根据中华人民共和国国家食品药品监督管理总局(CFDA)“药物相互作用的指导原则”(2012)指出：新药的代谢应该在药物研发过程中进行确定，该药与其他药物之间的相互作用应作为安全性和有效性评价的一部分进行研究。由于口服及静脉注射药物或其代谢产物的消除通常是在肝脏中进行代谢，因此目前药物代谢的体外研究方法所选用的组织大多为肝脏及其亚细胞组织。

随着医学的不断发展，吸入治疗被世界卫生组织(WHO)和欧美推荐为哮喘、COPD等呼吸道疾病的首选疗法，肺部吸收表面积大、毛细血管网丰富，从而使得肺部给药起效较快，通过吸入给药刺激性较小，使用方便，患者顺应性好，可适用于需进行长期治疗的患者。因此，研究与开发新型的吸入性药物是治疗呼吸道疾病和部分全身作用药物的重要途径。然而，吸入性制剂药物通过肺部给药，避免了肝脏首过效应，直接作用于肺部组织，因此，对其进行药物代谢特征研究选用肝细胞及其亚细胞组织并不完全适用，目前对其代谢特征及药物相互作用的研究局限于具体化合物代谢路径的分子机制研究，个性化的研究方案不具有普适性，且方法的稳定性差，假阳性与假阴性概率高，对于药物肺部代谢特征的体外研究尚缺乏完善的技术方案。

(Aune T,et al.Deacetylation to 2-aminofluorene as a major initialreaction in the microsomal metabolism of 2-acetylaminofluorene to mutagenicproducts in preparations from rabbit lung and liver[J].Cancer Research,1985,45(11Pt2):5859.)公开了兔肺微粒体对于2-乙酰氨基芴和2-氨基芴的代谢活性不同，且肺的代谢活性高于肝的代谢活性，预示某些药物可能在肺中代谢更旺盛，而对于此类药物采用肝代谢评价标准则多不准确，无法正确评估药物在体内的代谢情况。

因此，提供一种评价药物，特别是吸入性药物肺部代谢特征的体外研究方法具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足及实际的需求，本发明提供了一种药物肺部代谢特征的体外评价方法，特异性选择阳性底物及其使用浓度，建立肺部代谢特征的体外评价方法，提高评价方法的灵敏度与稳定性，降低评价过程中的假阳性和假阴性概率，为药物安全性评价研究提供方法学支持。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种药物肺部代谢特征的体外评价方法，所述方法包括如下步骤：

(1)制备肺亚细胞组织；

(2)采用步骤(1)所得肺亚细胞组织分别配制阳性质控体系、阴性质控体系、对照组反应体系和试验组反应体系，孵育培养，离心取上清液；

(3)分别检测步骤(2)所述阳性质控体系和阴性质控体系上清液中的阳性底物的母体含量，以及对照组反应体系和试验组反应体系上清液中的待测物的母体含量；