[发明专利]Guanacastane类化合物及其制备方法和在制备抗菌药物中的应用

权利要求书

1.如式(I)所示任一Guanacastane类化合物：

1为化合物koninginol A、2为化合物koninginol B。

2.一种权利要求1所述的Guanacastane类化合物koninginol A和koninginol B的制备方法，其特征在于，所述的化合物koninginol A和koninginol B是从拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)A729的发酵培养物中制备得到。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，具体步骤如下：

制备拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)A729的发酵培养物，将发酵培养物的发酵液和菌丝体分离，发酵液经大孔树脂柱用乙醇洗脱得到乙醇提取物，乙醇提取物经浓缩后得到浸膏；

浸膏过硅胶柱，先用石油醚-乙酸乙酯从5:1,1:1v/v梯度洗脱，再用二氯甲烷:甲醇从5:1,2:1v/v梯度洗脱，最后用二氯甲烷:甲醇＝1:1v/v洗脱，收集二氯甲烷:甲醇＝5:1v/v洗脱下来的馏分，以此馏分进行TLC薄层层析，以二氯甲烷：甲醇＝10:1v:v作为展开剂，收集Rf值是1.8/3.5的馏分E；

馏分E以二氯甲烷:甲醇＝1:1v/v洗脱过Sephadex LH-20，然后过正相硅胶柱层析，以体积比正己烷：乙酸乙酯10:1,5:1,2:1,1:1,1:2,1:5梯度洗脱，再用纯乙酸乙酯洗脱，最后用纯甲醇洗脱，分别收集正己烷：乙酸乙酯＝1:2,1:5v/v洗脱下来的馏分E9和E10，以馏分E9进行TLC薄层层析，以正己烷：乙酸乙酯＝1:2v:v作为展开剂，收集Rf值是1.2/3.5的馏分E9-1，以馏分E10进行TLC薄层层析，以正己烷：乙酸乙酯＝1:5v:v作为展开剂，收集Rf值是1.4/3.5的馏分E10-1；

馏分E9-1以体积比为70％的甲醇/水洗脱过半制备型HPLC，流速3mL/min，收集保留时间为11.4min的组分，然后以体积比为65％的乙腈/水洗脱过半制备型HPLC，流速3mL/min，收集保留时间为7.2min的组分，得到化合物koninginol A；

馏分E10-1以体积比为70％的甲醇/水洗脱过半制备型HPLC，流速3mL/min，收集保留时间为21.2min的组分，得到化合物koninginol B。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的制备拟康宁木霉(Trichodermakoningiopsis)A729的发酵培养物是将活化的拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)A729接入马铃薯葡萄糖液体培养基中，28℃，200rpm，培养5d制得种子液，将种子液以体积比10％的接种量接入到马铃薯葡萄糖液体培养基中，28℃，200rpm，振荡培养7d，而制得发酵培养物。

5.拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis)A729在制备权利要求1所述的化合物koninginol A或koninginol B中的应用。

6.权利要求1所述的化合物koninginol A或koninginol B在制备抗菌药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的化合物koninginol A在制备抗枯草芽孢杆菌药物中的应用；所述的化合物koninginol B在制备抗金黄色葡萄球菌或枯草芽孢杆菌药物中的应用。

8.一种抗菌药物，其特征在于，含有权利要求1所述的化合物koninginol A或koninginol B作为有效成分。

9.根据权利要求8所述的抗菌药物，其特征在于，当有效成分为化合物koninginol A时，所述的抗菌药物为抗枯草芽孢杆菌的药物；当有效成分为化合物koninginol B时，所述的抗菌药物为抗金黄色葡萄球菌或枯草芽孢杆菌的药物。