[发明专利]一种基于代谢组学的降脂作用机制研究方法

说明书

本发明公开了一种基于代谢组学的降脂作用机制研究方法，基于UPLC‑Q‑TOF/MS技术和代谢组学研究方法对高脂血症大鼠尿液代谢物进行检测，通过代谢组学研究方法寻找差异代谢物，通过筛选排除机制，获得13种具有降脂作用机制的特异性生物标记物，利用生物标记物含量的回调变化来实现对降脂作用机制的识别及高通量分析；通过MetaboAnalyst在线分析软件对差异代谢物进行通路分析，可从整体水平综合评价广陈皮降脂作用机制，为中药的代谢组学及作用机制的阐明提供示范性研究。

技术领域

本发明涉及中医药研究领域，具体涉及一种基于代谢组学的降脂作用机制研究方法。

背景技术

高血脂症是一种人体中脂质代谢紊乱或异常的现象。发病率逐年增高，发病人群也逐渐增大，并且呈现年轻化趋势。临床常用降脂药物多为西药，虽疗效显著，但长期服用易引发严重不良反应。中药对调节脂质代谢具有多靶点、多途径、不良反应小等优点，但是存在作用机理及信号通路不明确的缺点，需要我们进一步努力。随着研究水平和技术的提高，需要发现新的生物标记物来解释高脂血症潜在的复杂病理生理机制。

对于高脂血症的病机，中医认为，脾运不足、水谷不能化为精微以至于聚而为痰，一旦停于血脉而成为膏脂，健脾益气可使人体内水谷得到运化，利水消痰可以使痰消之导之，起到调节血脂代谢平衡的作用。广陈皮具有健胃、燥湿化痰的功效，是健脾行气代表药物之一。广陈皮属于芸香科，是茶枝柑的成熟果实的果皮，主产于广东新会，是一种药食同源、食养俱佳的著名中药，也是中国广东的道地药材之一。近代药理证明广陈皮具有保肝，降脂等作用，为治疗高血脂奠定理论基础。由于活性化合物的复杂性和多组分未知的协同作用，阐明其药理作用机制仍然是一项艰巨的任务。

代谢组学是一种研究基因及其在刺激或干扰前后的动态变化的技术。代谢组学以其可行性和有效性被广泛应用于中医药方面，通过代谢组学结合模式识别分析揭示中药的疗效。

但是目前为止尚未有使用代谢组学方法研究广陈皮降脂作用的报导，因此需开发一种基于代谢组学的降脂作用机制研究方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种基于代谢组学的降脂作用机制研究方法。

本发明的目的在于提供高血脂模型生物标记物及广陈皮具有降脂作用(P<0.05)的特异性生物标记物。

本发明所采取的技术方案是：

一种基于代谢组学的降脂作用机制研究方法，包括以下步骤：

(1)实验分组：将大鼠分为以高脂饲料喂养的模型组，普通饲料喂养的空白对照组，广陈皮干预高脂饲料喂养的给药组；

(2)收集大鼠的血清与尿液样本，血液样本用于检测血脂四项，尿液样本用于代谢组学分析；

(3)样品的前处理与UPLC-Q-TOF/MS检测；

(4)数据处理，比较空白对照组与模型组，筛选出高血脂模型生物标记物，与给药组对比筛选出具有降脂作用机制的特异性生物标记物；

(5)通过MetaboAnalyst在线分析软件对上述步骤获得的特异性生物标记物进行通路分析。

进一步的，步骤(1)所述的高脂饲料喂养的模型组是采用每天饲喂由83.6％普通饲料、15％猪油、1.2％胆固醇和0.2％胆酸钠组成的高脂饲料的方法得到的。

进一步的，所述的给药组所用的广陈皮为广陈皮水煎液，每ml含有1g生药，广陈皮每天给药量为1.04g/kg。

进一步的，步骤(2)所述的大鼠血清样本是通过腹主动脉取血至真空管，离心取上清液，取自第30天的血清样本；尿液样本是收集正常对照组，模型组和广陈皮组第30天的尿样。