[发明专利]一种能实现分泌表达复合肽的scAAV及方法和应用

权利要求书

1.一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，包含信号肽-人工内含子-第一表达肽-拼接序列1-拼接序列2-第二表达肽-拼接序列3-第三表达肽-顺反子重组表达盒；或者包含信号肽-第一表达肽-(GGGGS)₃(柔性连接子-第二表达肽-柔性连接子-第三表达肽-终止子的融合表达盒)。

2.根据权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表达肽为P53N端15肽，第二表达肽为37aa的P73激动肽，第三表达肽为P53C端22肽。

3.根据权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表达肽为HRALI S-iRGD，第二表达肽为Shesherdin-iRGD肽。

4.根据权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表达肽为PR39，第二表达肽为Thymosin beta 4。

5.根据权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表达肽为NTA8肽(NAPVSIPQ)，第二表达肽为43aa的Thymosin β4 Ac-SDKP-GS-GLP_1序列肽，第三表达肽为BDNF受体结合肽。

6.根据权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表达肽是抗抗Aβ(1-42)肽的微小抗体(scFv)；所述第二表达肽是ABAD-Dp Aβ相关乙醇脱氢酶阻断肽(ABAD decoy peptide，ABAD-DP)即ABAD的L_D拓扑结构环的92-120aa区，含有能与Aβ结合的区域；第三表达肽为Humanin。

7.根据权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，所述第一表达肽为BDNF受体loop2界面激动肽B3和B5；第二表达肽为Ac-SDKP-GLP-1(32-36)HA2-TAT；第三表达肽为exendin439肽。

8.根据权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV，其特征在于，重组表达盒中包含有编码信号肽的信号肽核酸序列；所述信号肽核酸序列位于核酸片段上游，下游插入有内含子和拼接子序列目的肽序列。

9.一种利用如权利要求1-8任意一项所述的能实现分泌表达复合肽的scAAV控制分泌表达方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：确定治疗疾病目标，选定靶点基因；

步骤2.确定使用的目的肽片段；

步骤3.将所述目的肽片段插入到载体，从而实现内含子-拼接子控制分泌表达。

10.权利要求1所述的一种能实现分泌表达复合肽的scAAV在制备抗肿瘤药物、治疗糖尿病药物、治疗心脑血管栓塞缺血缺氧性疾病药物中的应用。