[发明专利]一种双光子荧光探针及其制备和应用

权利要求书

1.一种双光子荧光探针在检测水环境或生物样品中的谷胱甘肽硫转移酶过程中的应用，其特征在于：所述荧光探针的结构如通式Ⅰ所示：

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通式Ⅰ中，R₁为H、C₁～C₁₀的烷基；R₂为H、C₁～C₁₀的烷基、卤代甲基、氨基、氰基中的一种或二种。

2.一种双光子荧光探针在检测水环境或生物样品中的谷胱甘肽硫转移酶过程中的应用，其特征在于：所述荧光探针为具有如下结构的化合物NIA、NIB、NIC、NIE、NIF、NIG、NIH、NIL、NIN中的一种或二种以上；

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3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，对通式I表示的化合物采用与发射光波段完全分开且可穿透生物样品的红外激光进行双光子激发用于检测生物体外水环境或生物样品中的谷胱甘肽硫转移酶，经酶作用后生成具有通式II结构的化合物，从而导致荧光发生显著的增强，此过程可实现对谷胱甘肽硫转移酶的双光子激发荧光检测；

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通式II

通式II中，R₁为H、C₁～C₁₀的烷基，R₂为-OH或-O^-。

4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，具有如下结构的化合物NIA、NIB、NIC、NIE、NIF、NIG、NIH、NIL、NIN中的一种或二种以上，均可用于存在于模拟生理环境即pH为7.4的HEPES缓冲溶液中的谷胱甘肽硫转移酶的检测，生成4-羟基-N-丁基-1,8萘酰亚胺，在pH为7.4时，有一部分4-羟基-N-丁基-1,8萘酰亚胺的羟基会脱去质子；

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5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，用于双光子激发荧光检测谷胱甘肽硫转移酶，通式I表示的化合物和通式II表示的化合物均具有双光子吸收性能，从而可在双光子激发下检测谷胱甘肽硫转移酶；

谷胱甘肽硫转移酶的测定包括以下工序：

（a）使具有通式I结构的化合物与谷胱甘肽硫转移酶反应；

（b）测定由上述工序中的反应引起的荧光强度变化。