[发明专利]一种通过蛋白质检测鉴别蜂蜜掺假的方法有效
| 申请号: | 201811435611.3 | 申请日: | 2018-11-28 | 
| 公开(公告)号: | CN109541060B | 公开(公告)日: | 2021-06-29 | 
| 发明(设计)人: | 沈立荣;江唯健;张一帆;陶保华;郝星凯;陈启 | 申请(专利权)人: | 杭州谱胜检测科技有限责任公司 | 
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 | 
| 代理公司: | 杭州知见专利代理有限公司 33295 | 代理人: | 赵越剑 | 
| 地址: | 310000 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 通过 蛋白质 检测 鉴别 蜂蜜 掺假 方法 | ||
1.一种通过蛋白质检测鉴别蜂蜜掺假的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)定量检测样品中的MRJP1~ MRJP5蛋白,获得样品中MRJP1~ MRJP5蛋白的含量,分别记为m1~m5;同时测定样品的总糖含量、干重含量和总蛋白含量,分别记为M1,M2和M3;
(2)将m1~m5中的一种或几种之和除以M1、M2或M3,然后乘以100%,所得比值与设定的阈值进行比较,若所得比值<设定的阈值,则判定该样品为掺假产品;
将m1除以M1,然后乘以100%,所得比值与设定的阈值进行比较,若所得比值<设定的阈值,则判定该样品为掺假产品;设定的阈值为0.0167%;
将m1+ m2+ m3之和除以M2,然后乘以100%,所得比值与设定的阈值进行比较,若所得比值<设定的阈值,则判定该样品为掺假产品;设定的阈值为0.0341%;
采用液相色谱串联质谱对MRJP1~ MRJP5蛋白进行定量检测;采用胰蛋白酶对样品进行酶解后,再上液相色谱串联质谱检测;
液相色谱分离条件如下:使用C18色谱柱,A相为0.1%甲酸水溶液,B相为0.1%甲酸乙腈溶液;洗脱条件为 B相0-9 min从3%到30%,9-10 min从30%到40%,10.1 min升到100%保持到10.6 min,10.7 min回到3%保持到13 min;流速为0.3 mL/min;
质谱检测条件如下:毛细管电压:3.0kv,锥孔电压:15 V,脱溶剂温度:550℃,脱溶剂气流量:400L/min,锥孔反吹气流量:30L/hr,碰撞室压力:3 .0×10-3 mbar;低端分辨率1:2.5V,高端分辨率1:15 .0V,离子能量1:0 .6eV;低端分辨率2:2 .0V,高端分辨率2:15 .0V,离子能量2:2 .0 eV;离子源温度:150℃,提取器电压:5 .0V,入口透镜电压:10V,出口电压:10V。
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