[发明专利]一种异紫草酸的制备方法

说明书

本发明涉及一种异紫草酸的制备方法，即4‑(2‑羧基乙烯基)‑2‑(3,4‑二羟基苯基)‑2,3‑2H‑7‑羟基‑3‑苯骈呋喃羧酸‑3‑[1‑羧基‑2‑(3,4‑二羟基)乙基]酯的制备方法，所述方法，步骤如下：步骤1、异紫草酸的富集，步骤2：异紫草酸粗品的制备，步骤3：异紫草酸纯品的制备。本方法步骤少，纯度高，操作简单。

技术领域

本发明涉及一种药物化合物的制备，属于医药化工领域，具体涉及一种异紫草酸的制备方法。

技术背景

4-(2-羧基乙烯基)-2-(3,4-二羟基苯基)-2,3-2H-7-羟基-3-苯骈呋喃羧酸-3-[1-羧基-2-(3,4-二羟基)乙基]酯，又名异紫草酸，为紫草酸的同分异构体，其结构见结构式Ⅰ：

异紫草酸的由来，该化合物最早是利用液质检测到的丹酚酸B水溶液的降解产物，(上述相关信息见文献：Yong-Xue Guo etc.，Kinetics and mechanism of degradationof lithospermic acid B in aqueous solution，Journal of Pharmaceutical andBiomedical Analysis 43(2007)1249–1255)后由韩国学者在丹酚酸B水溶液的降解产物中分离得到并报道了其核磁数据，其制备方法为：将丹酚酸B溶解在水中，并用HCl调节PH值为4.9。然后将上述水溶液100℃加热24小时，再在39℃下减压浓缩。浓缩液用Sephadex LH-20柱色谱(70-230目，2.0*132cm，柱床体积480ml)进行纯化，洗脱液为甲醇/水(8:2，V/V)。所得流份利用薄层色谱或液相分析进行合并，最终得到23个流份。洗脱体积和柱床体积比为1.30-2.40和3.96-4.58的流份合并后使用制备液相(色谱柱：20*250mm，流速：9.9ml/min，检测波长：280nm，流动相：三氟乙酸调节PH值为2.65，A乙腈/水10:90V/V，B乙腈/水10:90V/V，洗脱梯度在70分钟内100％A→100％B，100％B维持15分钟)进行纯化，得到异紫草酸(t_R35.33min)。该文献明确了异紫草酸的结构，如结构式Ⅰ所示。(上述相关信息见文献：HyoungJae Lee etc.，Chemical conversions of salvianolic acid B by decoction inaqueous solution，Fitoterapia 83(2012)1196–1204)。

该工艺极其复杂、用到多种有机试剂，并且对高压分离设备的依赖性高，制备周期长，成本高。

丹参酚酸提取物，包括符合2015版中国药典标准的市售丹参总酚酸提取物(《中国药典》2015年版第1部中397-398页)和现有市场上销售的注射用丹参多酚酸的制剂原料丹参多酚酸提取物(其方法很多种，例如CN105588885A，申请号为201410572435.3背景技术中提到的制备方法)，其中符合2015版中国药典标准的市售丹参总酚酸提取物制备方法为：取丹参、切成小段，加水于80℃提取两次，合并提取液，滤过，滤液于60℃减压浓缩至相对密度为1.18-1.22(50℃)的清膏，放冷，加乙醇使得含醇量为70％，静置12小时，取上清液，减压回收乙醇，并浓缩至稠膏，干燥，即得。

经过进一步分析发现丹参酚酸提取物指纹图谱的建立方法为UPLC法，色谱条件如下：

仪器：Waters UPLC-PDA

色谱柱：Waters Acquity HSS T3 1.8um

流动相：A：0.1％甲酸水，B：乙腈

梯度洗脱：

表1：梯度洗脱表