[发明专利]一种脱抗原肌腱处理方法有效
申请号: | 201811426509.7 | 申请日: | 2018-11-27 |
公开(公告)号: | CN109621009B | 公开(公告)日: | 2021-07-16 |
发明(设计)人: | 赵彦涛;衷鸿宾;侯树勋;韩丽伟;胡先同;白玉龙;张看;李利;张春丽;章亚东 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院第四医学中心 |
主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36;A61L27/20;A61L27/54 |
代理公司: | 北京诚呈知识产权代理事务所(普通合伙) 11883 | 代理人: | 杨凌波 |
地址: | 100037*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 抗原 肌腱 处理 方法 | ||
1.一种脱抗原肌腱处理方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)取离体新鲜肌腱,使用生理盐水洗净血污、杂质;
(2)将肌腱浸泡于PBS缓冲液中,震荡过夜,生理盐水清洗;
(3)将肌腱浸泡于含有羟乙基淀粉和硫酸软骨素的浸泡液中,进行阶段性加压处理1-2次;
所述浸泡液中含羟乙基淀粉40-60g/L,硫酸软骨素35-45g/L,胶原蛋白10-20g/L,维生素C 5-10g/L,维生素E 5-10g/L,IGF-Ⅰ100-200mg/L;
肌腱与浸泡液的比例为10-20g肌腱/100mL 浸泡液;
所述阶段性加压过程控制温度为4℃;
所述阶段性加压处理程序如下:
1)0.5-5MPa,2-4h;
2)15-25MPa,10-15min;
3)35-40MPa,2-5min;
(4)对加压处理后的肌腱进行脱抗原处理:
1)将肌腱置于含0.1%TritonX-100,0.1%胰蛋白酶的PBS缓冲液中,37℃,100-150rpm消化2h;
2)使用含0.1%TritonX-100的乙醇溶液清洗肌腱2-3次;
3)使用1/2浸泡液清洗肌腱1-2次;
(5)对肌腱进行辐照灭菌。
2.根据权利要求1所述的一种脱抗原肌腱处理方法,其特征在于,所述步骤(2)中震荡条件为37℃,200-400rpm。
3.根据权利要求1所述的一种脱抗原肌腱处理方法,其特征在于,所述阶段性加压处理程序如下:
1)1.5MPa,2.5h;
2)20MPa,10min;
3)35MPa,3min。
4.根据权利要求1所述的一种脱抗原肌腱处理方法,其特征在于,所述辐照剂量为35-45kGy。
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