[发明专利]一种通过遗传改造提高裂殖壶藻ATCC20888油脂和DHA含量的方法有效
| 申请号： | 201811423642.7 | 申请日： | 2018-11-27 |
| 公开（公告）号： | CN109517834B | 公开（公告）日： | 2022-06-07 |
| 发明（设计）人： | 张卫文;王方忠;陈磊;刘璐 | 申请（专利权）人： | 昆明藻能生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80 |
| 代理公司： | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人： | 赛晓刚 |
| 地址： | 650108 云南省昆明市五华区科发路139号*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通过 遗传 改造 提高 裂殖壶藻 atcc20888 油脂 dha 含量 方法 | ||
1.一种通过遗传改造提高保藏编号为ATCC20888的裂殖壶藻(
(1)构建来源于隐甲藻（
(2)将苹果酸酶基因过表达盒转化进入保藏编号为ATCC20888的裂殖壶藻藻种，在富集培养基中测试其油脂和DHA含量；
(3)构建来源于高山被孢霉菌（
(4) 以上一步获得的藻种为出发藻种，将含有延长酶基因的过表达盒转化进入藻体内，获得最终藻种；
(5) 在富集培养基中对最终藻种进行油脂和DHA含量的检测，鉴定最终藻种油脂和DHA含量情况；
所述过表达特定酶编码基因，是通过电穿孔的方法导入到保藏编号为ATCC20888的裂殖壶藻细胞内的。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（2）所述富集培养基是由葡萄糖2～80g，酵母浸粉0.5～20g，蛋白胨0.25～10g，海盐1～40g，加水至1L而成，pH为7.0。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（1） 所述苹果酸酶基因是由CaMV35s启动子和CaMV poly(A)终止子控制。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤（3） 所述延长酶基因是由CaMV35s启动子和Nos终止子控制。
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