[发明专利]一种用于生物发酵的灭菌方法

说明书

本发明公开了一种用于生物发酵的灭菌方法，包含：备好发酵罐，打入消毒后的培养基液并开搅拌，盖上罐盖，排气阀全开，关闭空气进气，打开除罐底蒸汽之外的管路和阀门，并从其向罐中通入蒸汽，进行实消，当培养基液升温到80℃时，开罐底蒸汽，在100℃开始控制排气阀，升温至120℃时，保压20min，关闭罐底蒸汽供给，使培养基液倒流罐底一阀1.5min，之后继续开罐底蒸汽灭菌并进行保压，直到保压总时间达到30min，保压结束，先关闭罐底一阀，后关蒸汽，完成发酵罐实消，再进行降温，移入种子液。本发明提供的用于生物发酵的灭菌方法，可以理清易染菌环节，使生物发酵不会染菌，包括消后、接后、接前，都能避免再出现染菌。

技术领域

本发明涉及一种生物发酵灭菌工艺，具体地，涉及一种用于生物发酵的灭菌方法。

背景技术

现在生物发酵企业大面积容量生产基本生产过程中，灭菌是至关重要的环节。常用的灭菌的方式中包括空消、实消、连消等。空消是指空罐灭菌。实消就是将配制好的培养基放入发酵罐或其他装置中，通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行灭菌的操作过程，也称实罐灭菌。其中，通入蒸汽将培养基和所用设备加热至灭菌温度后，需要维持一定时间，再冷却到接种温度，也叫间歇灭菌、分批灭菌，属于单罐灭菌。

生物发酵需要不染菌的培养基液，包括种子液、大罐发酵培养液，发酵罐包括小罐、中罐、大罐几种。发酵培养基实消过程的具体操作如下：备好发酵罐后，打入培养基液开搅拌，盖上人孔盖，排气阀全开，关闭空气进气，开直接蒸汽、移种管路蒸汽、取样管蒸汽、PH调节阀蒸汽、补料管路蒸汽，培养基液开始灭菌升温。当罐温升温到90℃开入罐底蒸汽，在100℃开始控制排气阀，全过程保压120℃30分钟。结束时关罐底蒸汽一阀、夹层排水阀，关取样一阀，小排气出气蒸汽要流通取样用，关补料一阀、关移种一阀、PH控制一阀、关直接蒸汽一阀，开空气进入罐里保压，开循环水冷却，罐温到后关水，待移入种子液，消后检查。

移入种子液后需要取样，还有一些罐在培养几个小时染了菌，通过查消后的染菌罐批，主要原因有这几类，还包括消后染菌、接后染菌、接前染菌。消后染菌几个小时或几十个小时出现的染菌说明消毒不彻底、留有死角没有消毒好产生染菌，接后染菌主要是中罐带菌，接前染菌主要是中罐已经染菌。染菌则说明有地方没有消透培养基液，要排除困难污染死角，需要消毒工人要有操作能力，更重要的是有责任心，但是有了这些还是染菌，则要排除污染点。

发明内容

本发明的目的是提供一种生物发酵灭菌工艺，克服现有技术的不足，通过特殊的实消，实现死角灭菌。

为了达到上述目的，本发明提供了一种用于生物发酵的灭菌方法，其中，所述的方法包含：备好发酵罐后，打入消毒后的培养基液并开搅拌，盖上罐盖，排气阀全开，关闭空气进气，打开除罐底蒸汽之外的管路和阀门，并从其向罐中通入蒸汽，进行实消，当培养基液升温后，开罐底蒸汽，继续升温后控制排气阀，升温至预定温度时，开始保压，一段时间后关闭罐底蒸汽供给，使培养基液倒流罐底一阀，之后继续开罐底蒸汽灭菌并进行保压，直到保压结束，先关闭罐底一阀，后关蒸汽，完成发酵罐实消，再进行降温，移入种子液。发酵罐包括小罐、中罐、大罐，大罐和小罐、中罐操作一样只是大罐多了放罐的管路。

上述的用于生物发酵的灭菌方法，其中，所述的方法中，进行实消，当培养基液升温到80℃时，开罐底蒸汽，在100℃开始控制排气阀，升温至120℃时，保压20min，关闭罐底蒸汽供给，使培养基液倒流罐底一阀1.5min，之后继续开罐底蒸汽灭菌并进行保压，直到保压总时间达到30min，保压结束。