[发明专利]化合物lithocarolsA-F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

说明书

本发明公开了化合物lithocarols A‑F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明所述的化合物lithocarols A‑F是从海洋真菌Phomopsis lithocarpus FS508的发酵培养物中分离制备得到的。经试验证明，化合物lithocarols A‑F对肝癌细胞HepG‑2、乳腺癌细胞MCF‑7、神经胶质瘤细胞SF‑268和非小细胞肺癌细胞A549的IC₅₀值范围为10.5～87.7μM，显示出比较显著的抗肿瘤活性，可以用于制备抗肿瘤药物。

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，具体涉及化合物lithocarolsA-F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。

背景技术

癌症正严重威胁着人类的健康。目前，全球每年死于癌症的人数约为1000万，我国每年死于癌症的人数为250万人左右，而且这个数字还在逐年增长。当前，抗肿瘤药物的市场份额也在不断扩大，抗癌药物占医药市场份额高达30％。然而，目前抗癌药物大多存在特异性差、毒副作用强和价格昂贵等缺陷，使得癌症患者常因药物昂贵而放弃治疗或副作用大而意外致死。因此，提高抗癌药物特异性从而降低毒副作用将造福癌症患者，对人类健康和社会发展有着十分重要的现实意义。

深海来源的真菌比其他海洋微生物具有代谢产物丰富、产量大、结构类型多样及活性显著等优点，已成为海洋药物研发的热点。过去的几十年，大量的新天然产物从海洋微生物中被发现，其中部分化合物作为先导化合物已经吸引了大量有机合成化学家和药物化学家的关注，部分经半合成衍生生化的化合物已经进入临床药物实验。因此，从海洋微生物中发现新的独特结构的天然产物具有重要意义和经济价值。

发明内容

本发明的第一个目的是提供具有抗肿瘤活性的化合物lithocarols A-F。

本发明的化合物lithocarols A-F，其结构如式(I)所示：

其中，1为化合物lithocarol A、2为化合物lithocarol B、3为化合物lithocarolC、4为化合物lithocarol D、5为化合物lithocarol E、6为化合物lithocarol F。

本发明的第二个目的是提供一种化合物lithocarols A-F的制备方法，该制备方法中所述的化合物lithocarols A-F是从海洋真菌Phomopsis lithocarpus FS508的发酵培养物中分离制备得到的，具体包括以下步骤：

(1)制备海洋真菌Phomopsis lithocarpus FS508的固体发酵培养物，用乙酸乙酯萃取该固体发酵培养物，将乙酸乙酯萃取液经浓缩后得浸膏，将浸膏用甲醇水溶液分散，再用石油醚萃取，萃取剩下的甲醇水溶液部分蒸馏浓缩得到粗提物；

(2)将粗提物过硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯以体积比为10:1,7:1,9:2,2:1,1:1,0:1和二氯甲烷-甲醇以体积比为5:1,0:1分别作为洗脱剂，梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比2:1洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷：乙酸乙酯＝5:1v/v展开得Rf＝0.2-0.4的组分Fr.6，收集石油醚-乙酸乙酯体积比1:1洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷：乙酸乙酯＝2:1v/v展开得Rf＝0.2-0.5的组分Fr.7；

将组分Fr.6再经凝胶柱层析Sephadex LH-20，以二氯甲烷-甲醇体积比1:1作为洗脱剂洗脱，收集TLC薄层层析以正己烷：乙酸乙酯＝2:1v/v展开得Rf＝0.5-0.8的组分Fr.6.2，将组分Fr.6.2再经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯的体积比为6:1,3:1,2:1,1:1,1:2,0:1进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比6:1洗脱的组分Fr.6.2.1，将组分Fr.6.2.1用HPLC分离纯化，分别得到化合物lithocarols A-E；