[发明专利]化合物lithocarolsA-F及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

权利要求书

1.如式(I)所示的任一化合物：

其中，1为化合物lithocarol A、2为化合物lithocarol B、3为化合物lithocarol C、4为化合物lithocarol D、5为化合物lithocarol E、6为化合物lithocarol F。

2.一种权利要求1所述的化合物lithocarols A-F的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)制备海洋真菌Phomopsis lithocarpus FS508 GDMCC No.60433的固体发酵培养物，用乙酸乙酯萃取该固体发酵培养物，将乙酸乙酯萃取液经浓缩后得浸膏，将浸膏用甲醇水溶液分散，再用石油醚萃取，萃取剩下的甲醇水溶液部分蒸馏浓缩得到粗提物；

(2)将粗提物过硅胶柱层析，用石油醚-乙酸乙酯以体积比为10:1,7:1,9:2,2:1,1:1,0:1和二氯甲烷-甲醇以体积比为5:1,0:1分别作为洗脱剂，梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比2:1洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷：乙酸乙酯＝5:1v/v展开得Rf＝0.2-0.4的组分Fr.6，收集石油醚-乙酸乙酯体积比1:1洗脱获得的且经TLC薄层层析以正己烷：乙酸乙酯＝2:1v/v展开得Rf＝0.2-0.5的组分Fr.7；

将组分Fr.6再经凝胶柱层析Sephadex LH-20，以二氯甲烷-甲醇体积比1:1作为洗脱剂洗脱，收集TLC薄层层析以正己烷：乙酸乙酯＝2:1v/v展开得Rf＝0.5-0.8的组分Fr.6.2，将组分Fr.6.2再经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯的体积比为6:1,3:1,2:1,1:1,1:2,0:1进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比6:1洗脱的组分Fr.6.2.1，将组分Fr.6.2.1用HPLC分离纯化，分别得到化合物lithocarols A-E；

将组分Fr.7再经C18反相柱层析，以甲醇-水的体积比为50:50,60:40,70:30,80:20,90:10,100:0进行梯度洗脱，收集甲醇-水体积比90:10洗脱组分，得到组分Fr.7.6，Fr.7.6再经硅胶柱层析，以石油醚-乙酸乙酯的体积比为6:1,3:1,2:1,1:1,1:2,0:1进行梯度洗脱，收集石油醚-乙酸乙酯体积比6:1洗脱的组分Fr.7.6.1；将组分Fr.7.6.1用HPLC分离纯化，得到化合物lithocarol F；

所述的将组分Fr.6.2.1用HPLC分离纯化具体为：将组分Fr.6.2.1经全制备HPLC在YMC-ODS柱，流动相为体积比85:15的甲醇/水，流速为8mL/min的色谱条件下进行分离，于保留时间为16.9min收集洗脱组分，得到组分Fr.6.2.1.5，将Fr.6.2.1.5经进一步的半制备HPLC，使用Chiralpak IC柱，流动相为体积比92:8的正己烷/异丙醇，流速为3mL/min，收集保留时间为8.1min的洗脱组分，得到化合物lithocarol A，收集保留时间为9.4min的洗脱组分，得到化合物lithocarol B，收集保留时间为14.2min的洗脱组分，得到组分Fr.6.2.1.3，将Fr.6.2.1.3经进一步的半制备HPLC，使用YMCpack ODS-A/AQ柱，流动相为体积比85:15的乙腈/水，流速为3mL/min，收集保留时间为10.6min的洗脱组分，得到化合物lithocarol C，收集保留时间为14.8min的洗脱组分，得到组分Fr.6.2.1.4，将Fr.6.2.1.4经进一步的半制备HPLC，使用YMCpack ODS-A/AQ柱，流动相为体积比85:15的甲醇/水，流速为3mL/min，收集保留时间为11.7min的洗脱组分，得到化合物lithocarol D，收集保留时间为18.0min的洗脱组分，得到化合物lithocarol E；

所述的将组分Fr.7.6.1用HPLC分离纯化具体为：将组分Fr.7.6.1经全制备HPLC在YMC-ODS柱，流动相为体积比85:15的甲醇/水，流速为8mL/min的色谱条件下进行分离，收集保留时间为16.9min的洗脱组分，得到组分Fr.7.6.1.1，将Fr.7.6.1.1经进一步的半制备HPLC，使用Chiralpak IC柱，流动相为体积比95:5的正己烷/异丙醇，流速为3mL/min，收集保留时间为14.9min的洗脱组分，得到化合物lithocarol F。