[发明专利]一种高度有序的磷脂囊泡阵列的制备方法有效
申请号: | 201811375022.0 | 申请日: | 2018-11-19 |
公开(公告)号: | CN109297784B | 公开(公告)日: | 2021-02-12 |
发明(设计)人: | 毕洪梅;史国滨 | 申请(专利权)人: | 黑龙江八一农垦大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 哈尔滨市松花江专利商标事务所 23109 | 代理人: | 岳泉清 |
地址: | 163319 黑*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高度 有序 磷脂 阵列 制备 方法 | ||
一种高度有序的磷脂囊泡阵列的制备方法,它涉及一种磷脂囊泡的制备方法。本发明的目的是要解决现有大面积电极制备的磷脂囊泡杂乱无序,且磷脂囊泡尺寸不均一的问题。方法:一、电极的制备与清洗;二、磷脂干膜的涂抹及干燥;三、组装;四、电形成囊泡过程,得到高度有序的磷脂囊泡阵列。本发明突破性的实现了高度有序排列且尺寸均一的磷脂囊泡的简单快速制备,制备时间短,适合工业化生产。本发明可获得一种高度有序的磷脂囊泡阵列的制备方法。
技术领域
本发明涉及一种磷脂囊泡的制备方法。
背景技术
磷脂囊泡作为细胞的封闭基质模型,是解析细胞的精细结构,模拟细胞的生物学功能的优异模板,也是研究膜渗透压、膜曲度与张力等研究的极好模型。其中电形成法是制备具有细胞尺寸的磷脂囊泡的常用方法,但在传统的平面基底上形成的磷脂囊泡杂乱无序,对于要求磷脂囊泡分散且有序的试验研究造成一定困难。
发明内容
本发明的目的是要解决现有大面积电极制备的磷脂囊泡杂乱无序,且磷脂囊泡尺寸不均一的问题,而提供一种高度有序的磷脂囊泡阵列的制备方法。
一种高度有序的磷脂囊泡阵列的制备方法,是按以下步骤完成的:
一、电极的制备与清洗:
首先采用光刻法在ITO导电玻璃表面制备条纹微电极,得到条纹微电极基片;将条纹微电极基片放入质量分数为1%~1.5%的碳酸钠溶液中超声洗涤1min~3min,超声功率为250W~300W,再使用蒸馏水清洗2次~3次,最后使用氮气吹干,得到清洗后的条纹微电极基片;
步骤一中所述的条纹微电极为多个条形电极并联组成的阵列式,其中每个条形电极的宽度为10μm~50μm,每两个条形电极之间的距离为10μm~50μm,且条形电极的宽度与两个条形电极之间的距离相等;
二、磷脂干膜的涂抹及干燥:
①、将磷脂溶解到氯仿中,得到浓度为0.5mg/mL~20mg/mL的磷脂溶液;
②、将浓度为0.5mg/mL~20mg/mL的磷脂溶液均匀地涂覆到清洗后的条纹微电极基片上的条纹微电极表面,再在温度为23℃~26℃的条件下真空干燥2h~3h,得到表面覆盖有厚度为150nm~200nm磷脂层的条纹微电极基片;
三、组装:将两片表面覆盖有厚度为150nm~200nm磷脂层的条纹微电极基片和聚四氟乙烯框架组成密闭制备装置,再向密闭制备装置中注入蔗糖溶液或葡萄糖溶液,得到磷脂囊泡形成池装置;
步骤三中所述的蔗糖溶液的浓度为100mmol/L~200mmol/L;
步骤三中所述的葡萄糖溶液的浓度为100mmol/L~200mmol/L;
四、将两片表面覆盖有厚度为150nm~200nm磷脂层的条纹微电极基片上的覆盖有厚度为150nm~200nm磷脂层的条纹微电极分别与信号发生器相连接,在波形为正弦波、交流电压为1V~9V和频率为1Hz~104Hz的条件下反应5min~120min,得到高度有序的磷脂囊泡阵列。
本发明的优点:
一、电形成方法是利用电场诱导电极表面的磷脂干膜在形成介质中的分离隆起,并形成球状囊泡。在大面积电极中,电场诱导的磷脂干膜隆起有顺序及隆起面积的不可限定性,可导致基底(ITO导电玻璃)上形成的磷脂囊泡尺寸有不均一性,本发明中可制备的条纹微电极中每个条形电极的宽度为10μm~50μm,由于条纹微电极中每个条形电极宽度的限制,限定了在每个条形电极表面的磷脂干膜的宽度和面积,在电场诱导下即可形成尺寸均一性、高度有序的磷脂囊泡阵列;
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