[发明专利]一种代谢调节融合蛋白的冻干粉制剂

说明书

本发明属于蛋白质和多肽药物技术领域，具体来说涉及一种代谢调节融合蛋白的冻干粉制剂，该制剂包括FGF21‑Fc融合蛋白，保护剂，缓冲剂，增溶剂；本发明还对该制剂的制备方法特别是冻干工艺进行优化，得到稳定的FGF21‑Fc融合蛋白冻干制剂。本发明制备的冻干制剂辅料少，进一步降低了临床用药的安全隐患，所得制剂外形饱满，质地均匀，复溶迅速，水分含量低于1％，稳定性好，方便储存和运输。

技术领域

本发明属于蛋白质和多肽药物技术领域，具体涉及一种代谢调节融合蛋白的冻干粉制剂。

背景技术

成纤维细胞生长因子是在发育中的组织和成体组织中表达的多肽。存在超过20种成纤维细胞生长因子的整个家族(FGF家族)。FGF家族的三个成员(包括FGF19、FGF21和FGF23)构成了一个亚家族，起着充当内分泌因子参与代谢调节的作用。成纤维细胞生长因子21或FGF-21，分子量为19.5KDa，由181个氨基酸组成，且与鼠源FGF21有75％同源性。FGF21是细胞代谢的一种调节因子，在体内和体外展现多种有利的影响，比如抑制肝葡萄糖生成，刺激脂肪组织葡萄糖摄取，增加褐色脂肪组织产热，保护胰岛素质量和胰岛素水平且无促有丝分裂效应和其他副作用。FGF21可作为胰岛素和GLP-1类似物的替代物，是治疗II型糖尿病药物中极具前景的一种。

长期的研究和临床实践表明FGF21和其他蛋白药物一样，存在稳定性差，储存期短等缺点，影响其治疗效果。专利CN107088224A公开了一种人FGF21冻干制剂，稳定性有所提高，制剂含水量较高，制剂在37℃下放置3个月，活性和纯度发生明显的变化，不能从根本上解决FGF21长期储存稳定性差的问题。

天然FGF21很难被开发成临床治疗用生物制剂，主要原因包括：1、FGF21蛋白稳定性差，易受蛋白酶水解或酶促降解；2、天然FGF21构象非常不稳定，易发生聚集，低稳定性同时也增加了FGF21在大规模生产中的难度；3、天然FGF21半衰期非常短，人FGF21在小鼠体内半衰期只有0.5-1小时，在食蟹猴体内半衰期2-3小时。多种蛋白长效化技术被报道用于延长重组FGF21的体内半衰期。例如，专利WO2005091944，WO2006050247，WO2008121563、WO2012066075公开了FGF21与PEG分子链接，增加分子量，降低肾小球滤过率，延长体内滞留时间；WO2010084169和WO2012010553公开了FGF21与脂肪酸长链融合(能够结合血清蛋白)；WO2011071783、WO2011130417，WO2012158704，WO2012170438公开了能与FGFR/FGFR/β-klotho复合物特异性的结合的激动剂抗体模拟FGF21作用机制，来激活FGF/FGFR信号通路；WO2004110472，WO2005113606，WO2009149171等公开了通过与Fc片段融合来改善FGF半衰期。