[发明专利]使用血培养阳性标本直接进行病原体鉴定及药敏检测的方法在审
| 申请号: | 201811367424.6 | 申请日: | 2018-11-16 |
| 公开(公告)号: | CN111197069A | 公开(公告)日: | 2020-05-26 |
| 发明(设计)人: | 张鲁榕;林经安 | 申请(专利权)人: | 福建医科大学附属第一医院 |
| 主分类号: | C12Q1/18 | 分类号: | C12Q1/18;C12R1/445;C12R1/22;C12R1/19;C12R1/36;C12R1/385;C12R1/01 |
| 代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 徐迅;崔佳佳 |
| 地址: | 350005 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 使用 培养 阳性 标本 直接 进行 病原体 鉴定 检测 方法 | ||
1.一种体外的对血培养阳性标本中病原体进行检测的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:
(a)提供一血培养阳性标本瓶,所述血培养阳性标本瓶中含有含阳性病原体的培养液,并从所述血培养阳性标本瓶中取出体积Va的样品(i),其中,所述样品(i)含有病原体和红细胞;
(b)将所述样品(i)进行溶血裂解处理,从而获得样品(ii);
(c)将所述样品(ii)进行离心,使得样品(ii)中病原体形成病原体沉淀物,并取所述病原体沉淀作为样品(iii);以及
(d)鉴定所述样品(iii)中病原体的种类和/或所述病原体对抗菌素的敏感性。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法的操作总耗时(即从步骤(a)至(d)的总耗时)为0.5小时。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的Va为3-15毫升,较佳地为4-12毫升,更佳地5-10毫升。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的血培养阳性标本瓶是含有阳性病原体的血培养阳性标本瓶。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(b)中,先对样品(i)进行离心处理,从而获得含病原体和血细胞的沉淀物;然后将所述含病原体和血细胞的沉淀物与红细胞裂解液进行混合,从而进行溶血裂解处理。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述步骤(c)之后,还包括步骤:
(c1)将样品(iii)用洗涤液重悬,并离心,弃上清,得沉淀,即样品(iv)。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的细菌选自下组:金黄色葡萄球菌、克雷白肺炎杆菌、大肠杆菌、奈氏菌、粪球菌、绿脓杆菌、肠产气菌、或其组合。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的对抗菌素的敏感性包括针对选自下组的抗生素的敏感性:庆大霉素(GM),左氧氟沙星(LEV),氨曲南(ATM),哌拉西林(PIP),呋喃妥因(FT),甲氧苄啶/磺胺(SXT),Erythroprim/磺胺(E),环丙沙星(CIP),阿米卡星(AN),亚胺培南(IPM),克林霉素(CM),喹奴普汀/达福普汀(QDA),莫西沙星(MXF),四环素(TE),万古霉素(VA),氨苄青霉素(AM),氨苄青霉素-舒巴坦(SAM),妥布霉素(TM),头孢替坦(CTT),头孢他啶(CAZ),头孢曲松(CRO),氨曲南头孢吡肟(FEP),哌拉西林(TZP),哌拉西林(PIP),替加环素(TGC),苯唑西林(OX1),头孢呋辛(CXM),利奈唑胺(LNZ),青霉素-G/苯甲基青霉素(P),利福平(RA),美罗培南(MEM)。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(d)中,鉴定所述样品(iii)中是否含有≥15种病原体以及所述病原体对≥25种抗菌素的敏感性。
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(a1)的培养时间为6至18小时,较佳地8至15小时,更佳地10至12小时。
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