[发明专利]一种双葡基海藻糖的制备方法

权利要求书

1.一种双葡基海藻糖的制备方法，其特征在于，包括将底物与双葡基海藻糖生产成套试剂进行反应得到双葡基海藻糖；所述双葡基海藻糖生产成套试剂包括麦芽四糖水解酶和麦芽寡糖基海藻糖合成酶；所述底物为淀粉或淀粉水解物。

2.根据权利要求1所述的一种双葡基海藻糖的制备方法，其特征在于，所述麦芽四糖水解酶为如下M1）或M2）的蛋白质：

M1）氨基酸序列是SEQ ID No.1的蛋白质；

M2）在SEQ ID No.1所示的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有所述麦芽四糖水解酶功能的由M1）衍生的蛋白质；

所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶为下述S1）或S2）的蛋白质：

S1）氨基酸序列为SEQ ID No.3的蛋白质；

S2）在SEQ ID No.3所示的氨基酸序列中经过取代和/或缺失和/或添加一个或几个氨基酸残基得到的具有所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶功能的由S1）衍生的蛋白质。

3.根据权利要求1或2所述的一种双葡基海藻糖的制备方法，其特征在于，所述双葡基海藻糖生产成套试剂还包括切支酶。

4.根据权利要求1或2所述的一种双葡基海藻糖的制备方法，其特征在于，双葡基海藻糖的制备方法还包括：将麦芽四糖水解酶基因导入受体细胞中进行表达得到所述麦芽四糖水解酶；所述受体细胞为微生物细胞、非人动物细胞或植物细胞。

5.根据权利要求1或2所述的一种双葡基海藻糖的制备方法，其特征在于，双葡基海藻糖的制备方法还包括：将麦芽寡糖海藻糖合成酶基因导入受体细胞中进行表达得到所述麦芽寡糖海藻糖合成酶；所述受体细胞为微生物细胞、非人动物细胞或植物细胞。

6.根据权利要求1或2所述的一种双葡基海藻糖的制备方法，其特征在于，所述麦芽四糖水解酶基因为下述M11）-M13）中的任一种DNA分子：

M11）编码序列是SEQ ID No.2所示的cDNA分子或基因组DNA；

M12）在严格条件下与M11）限定的DNA分子杂交且编码所述麦芽四糖水解酶的cDNA分子或基因组DNA；

M13）与M11）或M12）限定的DNA分子具有75％以上的同一性且编码所述麦芽四糖水解酶的cDNA分子或基因组DNA；

所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因为下述S11）-S13）中的任一种DNA分子：

S11）编码序列是SEQ ID No.4所示的cDNA分子或基因组DNA；

S12）在严格条件下与S11）限定的DNA分子杂交且编码所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶的cDNA分子或基因组DNA；

S13）与S11）或S12）限定的DNA分子具有75％以上的同一性且编码所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶的cDNA分子或基因组DNA。

7.一种根据权利要求1或2或3所述的双葡基海藻糖的制备方法中制备的双葡基海藻糖生产成套试剂。

8.一种用于生产双葡基海藻糖的生物材料，其特征在于：

C1）用于生产双葡基海藻糖的成套DNA分子，包括权利要求4-6中任一所述麦芽四糖水解酶基因和所述麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因，各基因各自独立包装；

C2）用于生产双葡基海藻糖的重组载体或成套重组载体，所述重组载体或所述成套重组载体能产生权利要求1或2或3所述双葡基海藻糖生产成套试剂；

C3）用于生产双葡基海藻糖的重组细胞或成套重组细胞，所述重组细胞或所述成套重组细胞能产生权利要求1或2或3所述双葡基海藻糖生产成套试剂。

9.一种根据权利要求8所述的用于生产双葡基海藻糖的生物材料制得的产品，其特征在于：

C2）所述重组载体或所述成套重组载体为利用C1）所成套DNA分子产生权利要求1或2或3所述双葡基海藻糖生产成套试剂的载体；

C3）所述重组细胞或所述成套重组细胞为利用C1）所成套DNA分子产生权利要求1或2或3所述双葡基海藻糖生产成套试剂的细胞。

10.如权利要求7中所述的双葡基海藻糖生产成套试剂在制备双葡基海藻糖中的应用；

如权利要求8中所述的用于生产双葡基海藻糖的生物材料在制备双葡基海藻糖中的应用；

如权利要求9中所述的产品在制备双葡基海藻糖中的应用。