[发明专利]一种透明质酸中邻苯二甲酸酯塑化剂残留的检测方法

说明书

本发明提供一种透明质酸中邻苯二甲酸酯塑化剂残留的检测方法，其包括：制样步骤，利用无水乙醇和塑化剂的标准品，经过过滤，制备塑化剂的标准品溶液，利用无水乙醇提取透明质酸中的塑化剂，进行过滤、浓缩，制作供试品溶液，无水乙醇经过滤作为空白溶液；和检测步骤，使用高效液相色谱检测所得到的供试品溶液、标准品溶液和空白溶液，使用外标法确定塑化剂的残留量。本发明的方法简便易行，不需使用质谱，降低了检测成本，准确度高，检测限不高于0.06mg/kg。

技术领域

本发明涉及塑化剂的检测领域，具体涉及一种检测透明质酸中的邻苯二甲酸酯塑化剂残留的方法。

背景技术

透明质酸(Hyaluronic acid，简称HA)又名玻璃酸，是由(1-3)-2-乙酰氨基-2-脱氧-D-葡萄糖(1-4)-D-D-葡萄醛酸双糖重复单位所组成的高分子量的直链粘多糖。1934年由Meyer等人从牛玻璃球眼中首次提取获得。

透明质酸以其独特的分子结构和理化性质在机体内显示出多种重要的生理功能，如润滑关节，调节血管壁的通透性，调节蛋白质，水电解质扩散及运转，促进创伤愈合等。尤为重要的是，透明质酸具有特殊的保水作用，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，被称为理想的天然保湿因子，由于HA具有良好的保湿性、粘弹性、渗透性和延展性，同时无任何免疫原性和毒性，被广泛应用于化妆品、食品、医药和临床治疗等行业领域。

透明质酸作为天然的保湿因子，早已被广泛应用到化妆品、医药等领域。近几年来，随着人们健康消费观念的形成，如何吃出健康与美丽成为人们关注的焦点，透明质酸在食品中的应用也越来越广泛，比如作为关节营养的膳食补充产品，以及作为补充水分、改善皮肤弹性的日常美容保健食品：透明质酸饮料、口服液、美容胶囊、酸奶、果冻、口香糖、绿茶等。若不能准确检测出透明质酸生产过程中带入的塑化剂含量，导致透明质酸塑化剂含量超标、纯度降低，长期使用塑化剂超标的透明质酸化妆品，或长期食用塑化剂超标的透明质酸产品，都会对健康造成很大的危害。

在应用透明质酸时为了良好地表现其特性以及对人体的安全性，需要保证其纯度和质量。由于透明质酸的生产原料以及生产过程中接触的容器、管线例如塑料软管等，不可避免会含有杂质。为了保证透明质酸中的杂质、特别是塑化剂的含量在规定范围以下，需要有效地检测塑化剂的方法。

塑化剂(Plasticizer)是一种增加材料的柔软性或是材料液化的添加剂。其中最常见的塑化剂是邻苯二甲酸酯类物质(Phthalate Esters,PAEs)，是邻苯二甲酸的酯化衍生物。邻苯二甲酸酯塑化剂是具些许芳香气味或无气味的无色液体，中等黏度、高稳定性、低挥发性、成本低廉、低水溶解度，但易溶于多数有机溶剂中。邻苯二甲酸酯类在日常及工业上被广泛使用，以邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)为最大宗，占塑化剂产量的四分之三，其次是邻苯二甲酸二丁酯(DBP)。邻苯二甲酸酯类塑化剂被归类为疑似环境荷尔蒙，其生物毒性主要属雌激素与抗雄激素活性，会造成内分泌失调，阻害生物体生殖机能，包括生殖率降低、流产、天生缺陷、异常的精子数、睾丸损害，还会引发恶性肿瘤、造成畸形儿。

目前，有关PAEs的检测方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、液质联用法(HPLC-MS)和气质联用法(GC-MS)。例如在专利文献1 中公开了一种食用油中邻苯二甲酸酯类塑化剂的检测方法，其中使用的是气相色谱-质谱联用检测。另外，在国家标准GB/T21911-2008“食品中邻苯二甲酸酯的测定”中，也公开了一种检测塑化剂残留的GC-MS法，其中，在试样处理中，对于不含油脂试样，是将5.0mL液体试样，加入正己烷2.0mL 萃取后，取上层清液进行GC-MS分析，另外对于固体或半固体试样而言，是将5.00g试样加约50mL水进行检测。对于含油脂试样，是将油脂试样 0.50g，用体积比为乙酸乙酯:环己烷10.0mL溶解处理后进行GC-MS分析。

现有技术文献

专利文献

专利文献1:CN 104698109A