[发明专利]一种重组克雷伯氏杆菌在制备1，3-丙二醇中的应用

权利要求书

1.一种重组克雷伯氏杆菌，其特征在于，是将来源于发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)的甘油通道蛋白基因glpF连接到过表达载体pEtac-28a上，将连接产物转入克雷伯氏杆菌(Klebsiella peneumoniae )中得到的，所述甘油通道蛋白基因glpF的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的重组克雷伯氏杆菌，其特征在于，所述过表达载体pEtac-28a是在pET-28a载体中引入了序列如SEQ ID NO.3所示的tac启动子。

3.根据权利要求2所述的重组克雷伯氏杆菌，其特征在于，所述过表达载体pEtac-28a的构建方法为：用EcoRI和BamHI双酶切pET28a和序列如SEQ ID NO.3所示的tac启动子，酶切后，PCR连接得到过表达载体pEtac-28a(+)。

4.权利要求1-3任一所述的重组克雷伯氏杆菌的构建方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)从发酵乳杆菌基因组中克隆甘油通道蛋白基因glpF，其核苷酸序列如序列表SEQID NO.1所示；

(2)将glpF基因与权利要求3中的过表达载体pEtac-28a相连，并将连接产物转化到克雷伯氏杆菌中。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述转化采用的是电击转化法。

6.权利要求1-3任一所述的重组克雷伯氏杆菌在生产1，3-丙二醇中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用是以甘油为底物，以重组克雷伯氏杆菌为生物催化剂，采用分批补料的方式进行全细胞转化。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述应用包括将菌液以4％接种量接种到5L发酵罐中，厌氧，补料分批发酵重组克雷伯氏杆菌，流加甘油，使其保持在15-30g/L，37℃，150rpm，发酵48h。

9.权利要求1-3任一所述的重组克雷伯氏杆菌在纺织、塑料及食品包装领域的应用。