[发明专利]阳离子交换层析法纯化抗体的方法

权利要求书

1.阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，包括如下步骤：

对抗体溶液进行阳离子交换层析处理，调节所述抗体溶液的pH为5.0-7.0、电导率为3-20mS/cm进行上样，平衡缓冲液的pH为5.0-7.0、电导率为3-20mS/cm，采用流穿模式或过载模式进行纯化。

2.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，调节所述抗体溶液的pH为5.0-7.0、电导率为12-20mS/cm，采用流穿模式进行纯化；

优选的，调节所述抗体溶液的pH为5.5-6.5，电导率为15-19mS/cm，采用流穿模式进行纯化；

更优选的，调节所述抗体溶液的pH为5.5，电导率为18±1mS/cm，采用流穿模式进行纯化。

3.根据权利要求1或2所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，采用所述流穿模式时，上样完成后，采用平衡缓冲液冲洗阳离子交换层析介质，收集流穿液；

优选的，所述平衡缓冲液的pH为5.0-7.0、电导率为12-20mS/cm；

优选的，所述流穿模式的抗体溶液的上样载量＞300g/L。

4.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，通过预实验的方式，确定流穿模式的上样抗体溶液的电导率，预实验的方法包括：调节抗体溶液的pH为5.0-7.0进行上样，上样载量＜300g/L；用平衡缓冲液-氯盐溶液梯度洗脱，收集洗脱液，分别检测纯度及杂质含量，以对应抗体纯度开始降低，多聚体含量开始升高时的洗脱液的电导率作为上样抗体溶液的电导率。

5.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，调节所述抗体溶液的pH为5.0-7.0、电导率为3-8mS/cm，采用过载模式进行纯化；

优选的，调节所述抗体溶液的pH为5.5、电导率为5mS/cm，采用过载模式进行纯化。

6.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，采用所述过载模式时，上样载量＞500g/L，完成上样；采用平衡缓冲液冲洗阳离子交换层析介质，收集流穿液；

优选的，所述平衡缓冲液的pH为5.0-7.0、电导率为3-8mS/cm。

7.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，上样前，采用平衡缓冲液对阳离子交换层析介质平衡处理；

优选的，采用所述流穿模式时，平衡缓冲液的pH为5.0-7.0、电导率为12-20mS/cm；

优选的，采用过载模式时，平衡缓冲液的pH为5.0-7.0、电导率为3-8mS/cm。

8.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，所述平衡缓冲液包括醋酸钠-醋酸缓冲液、柠檬酸缓冲液、磷酸盐缓冲液中的任一种；

优选的，所述平衡缓冲液为醋酸钠-醋酸缓冲液。

9.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，所述阳离子交换层析介质包括Fractogel COO-、Eshmuno CPX、POROS 50HS、POROS XS、Capto SPImpRes、Capto S、Capto S ImpAct、SP HP、Mustang S、Sartobind S中的任一种。

10.根据权利要求1所述的阳离子交换层析法纯化抗体的方法，其特征在于，所述抗体溶液的获取方法包括：通过蛋白A亲和层析对细胞培养液中抗体捕获，进行病毒灭活，调节pH至5.0-7.0后，进行深层过滤，得到所述抗体溶液。