[发明专利]短短芽孢杆菌液体深层发酵方法及可湿性粉剂制备方法

权利要求书

1.一种短短芽孢杆菌的液体深层发酵方法，其特征在于，将短短芽孢杆菌种子液按体积比为1～5％的接种量接入发酵培养基中进行发酵，直至所得发酵液中90％以上菌体形态为芽孢；

其中，发酵温度为28～32℃，搅拌速度为160～200r/min，通气量为15～60m³/h，发酵罐罐压为0.05～0.06Mpa。

2.如权利要求1所述短短芽孢杆菌的液体深层发酵方法，其特征在于，所述发酵培养基组成为：蔗糖糖蜜10～30g/L、黄豆粉5～15g/L、蛋白胨2～6g/L、MgSO₄0.5～3.5g/L和CaCO₃4～8g/L。

3.如权利要求1所述短短芽孢杆菌的液体深层发酵方法，其特征在于，所述短短芽孢杆菌种子液是由短短芽孢杆菌经菌种活化、一级种子液制备和二级种子液制备得到。

4.如权利要求3所述短短芽孢杆菌的液体深层发酵方法，其特征在于，所述菌种活化具体为将短短芽孢杆菌接种于营养琼脂培养基上进行培养，得到活化后菌种。

5.如权利要求4所述短短芽孢杆菌的液体深层发酵方法，其特征在于，所述一级种子液制备具体为将所述活化后菌种接种于含有酵母膏、蛋白胨和葡萄糖的种子培养基中进行摇瓶培养，得到一级种子液。

6.如权利要求5所述短短芽孢杆菌的液体深层发酵方法，其特征在于，所述二级种子液制备具体为将所述一级种子液接种于含有酵母膏、蛋白胨和葡萄糖的种子培养基中进行搅拌培养。

7.一种短短芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将短短芽孢杆菌种子液按体积比为1～5％的接种量接入发酵培养基中进行发酵，直至所得发酵液中90％以上菌体形态为芽孢；

(2)将步骤1)所得发酵液进行离心处理，得到浓缩菌液；

(3)将滑石粉、蔗糖、麦芽糊精与步骤2)所得浓缩菌液混合均匀后进行喷雾干燥，得到干粉菌剂；

(4)将十二烷基苯磺酸钠、有机硅、抗坏血酸与步骤3)所得干粉菌剂混合均匀后在30～50℃下粉碎，过400目筛后得到可湿性粉剂；

其中，按重量份计，滑石粉为20～30份，蔗糖为1～2份、麦芽糊精为0.5～1.5份，浓缩菌液为50～80份，十二烷基苯磺酸钠为1～4份，有机硅为0.3～1份，抗坏血酸为0.2～1份。

8.如权利要求5所述短短芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于，步骤1)中离心处理具体为在转速为6000～6600r/min下进行处理。

9.如权利要求5所述短短芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于，步骤3)中喷雾干燥的进风温度为230℃，出风温度为80～90℃。

10.如权利要求5所述短短芽孢杆菌可湿性粉剂的制备方法，其特征在于，按重量份计，滑石粉为25份，蔗糖为1.5份，麦芽糊精为1份，浓缩菌液为60份，十二烷基苯磺酸钠为3份，有机硅为0.5份，抗坏血酸为0.4份。