[发明专利]一种基于磁性分子印迹核/壳聚合物的藻红蛋白比率荧光传感器的制备方法

说明书

本发明具体涉及一种基于磁性分子印迹核/壳聚合物的藻红蛋白比率荧光传感器的制备方法。在Fe₃O₄磁性纳米粒表面偶联蓝荧光碳量子点B‑CDs，在偶联物表面生长含模板分子藻红蛋白的SiO₂壳层，洗脱模板，制得磁性分子印迹核/壳聚合物。测定不同藻红蛋白浓度下该聚合物分散液的荧光发射光谱，拟合藻红蛋白与B‑CDs荧光峰强度比率I_藻红蛋白/I_B‑CDs与藻红蛋白摩尔浓度之间的线性关系，构建检测藻红蛋白的比率荧光传感器。与现有技术相比，本发明方法操作简单，成本低廉，原料易得，比率信号抗干扰能力强，准确性好，灵敏度和选择性高，本发明的比率荧光传感器，可用于藻红蛋白的高效检测。

技术领域：

本发明属于纳米复合材料与分子印迹聚合物的制备技术领域，具体涉及一种基于磁性分子印迹核/壳聚合物的藻红蛋白比率荧光传感器的制备方法，其制备的传感器可用于藻红蛋白的高灵敏度和高选择性检测。

背景技术：

当前，海洋表面大规模繁殖的红藻造成的赤潮现象越来越严重，其对人体健康和水生资源的危害引起了广泛的社会关注。藻红蛋白是海藻中重要的捕光色素蛋白之一，其与藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白构成了藻胆蛋白的荧光家族。这些蛋白质是有效能量传递链的一部分，它将光捕获的复合物激发能量引导至含有叶绿素的反应中心，光能传递效率可达到95％。藻红蛋白主要从红藻中分离和纯化获得，其具有强荧光，良好的光吸收特性，高量子产率，以及在可见光区域存在广泛的激发和发射等特性。藻红蛋白可广泛用于诊断和生物工程技术领域，如荧光免疫分析、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、流式细胞技术、抗体荧光标记、生物成像、食品、化妆品等领域。对藻红蛋白进行精确检测仍然是当前亟待解决的问题之一，开发一种简单高效的鉴定和检测藻红蛋白的方法具有重要的意义。

分子印迹技术可在特定模板分子的存在下，将其高灵敏和高选择性地捕获到聚合物分子空穴中。在制备过程中，通过洗脱去除模板分子引起特定位点保留在形成的聚合物网络中，且形状和大小与模板分子相匹配。分子印迹聚合物的特异性位点和模板分子之间存在匹配关系，可实现对模板分子的高选择性和特异性检测。作为一种特殊的受体形式，分子印迹聚合物具有制备简单、廉价、选择性好、物理强度高、热稳定性好等优点，已被广泛应用于化学/生物传感器、色谱分离、固相萃取、药物释放等诸多重要领域。

经文献检索发现：Munier等从红色食用海藻中采用一步法纯化制得R-藻红蛋白(Mathilde Munier,MichèleJustine Dumay, Pascal Jaouen,Fleurence.One-step purification of R-phycoerythrin from the red edibleseaweed Grateloupia turuturu.Journal of Chromatography B,992(2015)23–29.)，其中R-藻红蛋白采用高效液相色谱法检测；Gameiro等对藻红蛋白进行了荧光表征(CarlaGameiro, Andrei B.Utkin,Paulo Cartaxana.Characterisation ofestuarineintertidal macroalgae by laser-induced fluorescence.Estuarine,Coastal andShelf Science 167(2015)119–124)；吴继魁等报道了一种利用R-藻红蛋白荧光来检测DNA杂交的方法(吴继魁,陆云飞,任宁娜,张俊玲.一种利用表面阳离子化的R-藻红蛋白检测DNA杂交的方法.中国发明专利.公开号CN108037103A)；王华林等制备了一种藻红蛋白标记的聚苯乙烯微球用作荧光探针(王华林,张涛,张科登.一种藻红蛋白标记聚苯乙烯微球的荧光探针制备方法.中国发明专利.公开号 CN108383936A)。