[发明专利]白及高温内参基因Bs18S rRNA和BsUBI

权利要求书

1.白及高温内参基因Bs18S rRNA和BsUBI，其特征在于，所述Bs18S rRNA基因，碱基序列如SEQ ID NO.6所示；所述BsUBI基因，碱基序列如SEQ ID NO.7所示。

2.用于PCR扩增获得白及高温内参基因Bs18S rRNA和BsUBI的引物，其特征在于，具体引物设计如下：

Bs18S rRNA-F：5’- TGGTTGATCCTGCCAGTAGT-3’，

Bs18S rRNA-R：5’- GTTCACCTACGGAAACCTTG-3’，

BsUBI-F：5’- ATGCAGATCTTCGTGAARACCCT-3’，

BsUBI-R：5’- CAGTAGTGGCGRTCGAAGTGGT-3’。

3.利用权利要求2所述引物获得白及高温内参基因Bs18S rRNA和BsUBI的PCR扩增方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）提取总RNA并反转录为cDNA作为扩增模板；

（2）利用引物进行PCR扩增。

4.白及高温内参基因Bs18S rRNA和BsUBI在白及中的应用，其特征在于，作为内参基因应用；

所述Bs18S rRNA基因，碱基序列如SEQ ID NO.6所示；所述BsUBI基因，碱基序列如SEQID NO.7所示。

5.如权利要求4所述白及高温内参基因Bs18S rRNA和BsUBI在白及中的应用，其特征在于，用于功能性基因核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基基因rbcL的荧光定量检测分析。

6.一种荧光定量检测核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶大亚基基因的检测方法，其特征在于，检测时以Bs18S rRNA和/或BsUBI作为内参基因，具体包括如下步骤：

（1）设计荧光定量检测用引物如下：

Bs18S rRNA-F：5’-TTTATGAAAGACGAACCACTGC-3’，

Bs18S rRNA-R：5’-TCGGCATCGTTTATGGTTG-3’；

BsUBI-F：5’-CGCCGATTACAACATCCAGAA-3’，

BsUBI-R：5’-TTCTTGGGCTTGGTGTATGTC-3’；

qBsrbcl-F：5’-CCAAAACTTTCCAAGGTCCG-3’，

qBsrbcl-R：5’- TCCACCCCGTAGACATTCATA-3’；

（2）提取白及总RNA并反转录为cDNA作为扩增模板，进行荧光定量PCR检测。