[发明专利]基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒、及其使用方法

权利要求书

1.基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒的组成包括：

溶液A：采用抗体稀释液将Human APOA4蛋白稀释成工作溶液，作为标准品；

溶液B：采用生物素检测抗体稀释液将浓缩生物素检测抗体稀释成工作溶液，所述浓缩生物素检测抗体采用鼠抗人AMY1A单克隆抗体；

溶液C：采用HPR共轭稀释剂将浓缩HRP结合物稀释成工作溶液；

溶液D：采用抗体稀释液将兔抗人AMY1A多克隆抗体稀释成工作溶液；

溶液E：Wash Buffer；

溶液F：显色液；

溶液G：终止液。

2.根据权利要求1所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒，其特征在于，所述溶液A中，Human APOA4蛋白浓度为300ng/mL。

3.根据权利要求1所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒，其特征在于，所述溶液B中，将浓缩生物素检测抗体100倍稀释成工作溶液。

4.根据权利要求1所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒，其特征在于，所述溶液C中，将浓缩HRP结合物100倍稀释成工作溶液。

5.根据权利要求1所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒，其特征在于，所述溶液D中，AMY1A抗体浓度为0.1ug/mL～5ug/mL。

6.根据权利要求1所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒，其特征在于，所述溶液E中，用ddH₂O将Wash Buffer 25倍稀释成工作溶液。

7.根据权利要求1-6任一项所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒的使用方法，其特征在于，采用ELISA法检测将所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒用于检测血清中APOA4蛋白表达水平。

8.根据权利要求7所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述使用方法包括以下步骤：

步骤1，取兔抗人AMY1A多克隆抗体用抗体稀释液稀释成工作溶液D，以50uL/孔加入96孔板中，保持4℃温度条件下静置；

步骤2，去上清液，以350uL/孔加入Wash Buffer，放置1～2min，去上清液，反复清洗，去上清液；

步骤3，每孔加入100uL标准品或者样品，于37℃孵育90min；

步骤4，采用步骤2的方法清洗，以100μL/孔加入工作溶液B，于37℃孵育1h；

步骤5，采用步骤2的方法清洗，以100μL/孔加入工作溶液C，于37℃孵育30min；

步骤6，采用步骤2的方法清洗，以90μL/孔加入显色液，于37℃显色15min；

步骤7，以50μL/孔加入终止液；

步骤8，用酶标仪测量450nm处的吸光度值。

9.根据权利要求8所述的基于APOA4蛋白胃癌检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述步骤3中使用的样品为采集的外周血清采用PBS稀释100倍～150倍制备获得。