[发明专利]鹅星状病毒卵黄抗体的制备方法及其产品

权利要求书

1.一种鹅星状病毒卵黄抗体的制备方法，其特征在于，包括：

(1)将鹅星状病毒液与佐剂配制后作为免疫原免疫健康产蛋鹅制备得到高免蛋，收集高免蛋；(2)将高免蛋的蛋壳消毒后，收集卵黄；采用酸水-卡拉胶法从卵黄中提取卵黄抗体。

2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中将鹅星状病毒液与油乳佐剂混合配制得到油乳佐剂免疫原；优选的，将鹅星状病毒液与油乳佐剂按照1:1.5的体积比例混合配制得到油乳佐剂免疫原。

3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述免疫的程序包括：

(1)基础免疫：将鹅星状病毒油乳佐剂免疫原皮下注射健康产蛋鹅星状病毒，每只1.0ml；

(2)加强免疫：基础免疫21日后，皮下注射相同的油乳佐剂免疫原，每只1.5ml；

(3)强化免疫：加强免疫21日后，皮下注射相同的油乳佐剂免疫原，每只2.0ml；

(4)维持免疫：在强化免疫接种后根据抗体效价，每隔2～3个月再加强接种1次，每只2.0ml。

4.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述高免蛋的收集方法包括：产蛋鹅星状病毒强化免疫接种结束后10日，每隔5日抽样测定高免鹅星状病毒蛋黄中抗体效价，当中和指数≥500时，收集高免蛋。

5.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的酸水-卡拉胶法包括：

(a)去除卵黄中的脂肪；(b)萃取：将上清液与λ-卡拉胶进行混合搅拌后静置；取上清液过滤后，滤液调至pH7.2；(c)过滤及浓缩：滤液加入辛酸后再进行过滤，将滤液浓缩；(d)将浓缩液进行灭活、稀释、除菌，即得。

6.按照权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(a)中所述的去除卵黄中的脂肪的方法包括：将卵黄与0.12mol/L，pH5.0的醋酸盐缓冲液混合均匀后调至pH5.2，置2～8℃静置，取上清液；优选的，将卵黄与0.12mol/L，pH5.0的醋酸盐缓冲液按照5:1的体积比进行配制；所述的静置时间为4小时。

7.按照权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(b)中将上清液与λ-卡拉胶按照1mL上清液:与6mgλ-卡拉胶的配比比例进行混合搅拌后静置。

8.按照权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(c)中所述的过滤采用孔径为1.0μm和0.45μm的筒式滤芯过滤；所述的浓缩是采用截留分子量为100kD的中空纤维超滤柱进行浓缩10倍；

优选的，所述的灭活是按终浓度为0.05％加入甲醛溶液，搅拌混匀，室温灭活24小时；所述的稀释是将浓缩灭活卵黄抗体用pH7.2的磷酸盐缓冲液稀释为琼扩抗体效价不低于1:4；所述的除菌是用孔径为0.22μm滤膜过滤除菌。

9.权利要求1-8任何一项制备方法得到的鹅星状病毒卵黄抗体。

10.权利要求9所述的鹅星状病毒卵黄抗体在制备诊断、预防或治疗由鹅星状病毒引起疾病的试剂或药物中的用途。