[发明专利]一种茶碱人工抗原的合成方法及其应用

权利要求书

1.一种茶碱人工抗原，其特征在于，其结构通式如下：

2.一种制备如权利要求1所述的茶碱人工抗原的方法，其特征在于,通过甲醛在茶碱7号位的N上衍生出羟基，用琥珀酸酐衍生出羧基，通过羧基与蛋白质偶联得到茶碱及其衍生物检测抗原，其反应式如下：

反应式一：

反应式二：

3.一种制备如权利要求1所述的茶碱及其衍生物检测抗原的方法，其特征在于，具体制备步骤如下：

(1)称取一定量的茶碱加入到50ml单口瓶中，并加入36％的甲醛溶液和三乙胺，室温充分搅拌一个小时，再加入四氢呋喃，室温搅拌5分钟，再静置两天，有白色固体析出，过滤并干燥得白色固体产物1，其中，茶碱、36％甲醛溶液、三乙胺和四氢呋喃的摩尔比为1:5.5-6.6:1.02:2.6；

(2)在干燥的50ml单口瓶中加入0.6g产物1，并加入DCM，再加入三乙胺，DMAP，丁二酸酐，室温反应过夜，反应结束后用1mol/l的盐酸洗两次反应液，每次5ml，有机相浓缩干，用DCM:MeOH＝100:1淋洗剂过柱得产物2，其中，产物1、DCM、三乙胺、DMAP和丁二酸酐的摩尔比为1:55:1.2:1.2:1.2；

(3)产物偶联载体蛋白：

(a)取60mg产物2溶于2ml DMF中，配置成浓度为30mg/ml的溶液；再配置10mg/ml的PBS-BSA蛋白溶液；

(b)在2ml×30mg/ml产物2的DMF溶液中加入41mg EDC，25mg NHS,得产物3，其中，产物2:EDC:NHS的摩尔比为1:1:1.12，室温搅拌8H；

(c)取(a)步骤中配制的PBS-BSA蛋白溶液27ml，然后滴入产物3；

(d)室温反应12小时得到终产物；

(e)PBS透析3天，得茶碱抗原，测得浓度为5.72mg/ml。

4.如权利要求1-3之一所述的茶碱抗原在制备免疫检测试剂盒中的应用。