[发明专利]一种宫内膜干细胞保护液及其制备方法在审
申请号: | 201811309119.1 | 申请日: | 2018-11-05 |
公开(公告)号: | CN109566597A | 公开(公告)日: | 2019-04-05 |
发明(设计)人: | 董明珠;宋莉莉;潘新;刘世红;卢家堃 | 申请(专利权)人: | 北京世纪劲得生物技术有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人: | 王玉松 |
地址: | 101200 北京市平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 宫内膜干细胞 保护液 复苏 制备 低分子右旋糖苷 中药提取物 肝素钙 海藻糖 罂粟碱 血清 冻存 保存 | ||
1.一种宫内膜干细胞保护液,其特征在于,所述保护液包括如下重量份的各成分:
1-5份的肝素钙、20-40份的低分子右旋糖苷、1-2份的罂粟碱、5-10份的海藻糖、800-1000份的水和4-6份的中药提取物;
所述中药提取物由如下重量份的成分制备而成:
2.权利要求1所述的宫内膜干细胞保护液,其特征在于,所述中药提取物由如下重量份的成分制备而成:
3.如权利要求1所述的宫内膜干细胞保护液,其特征在于,所述中药提取物的提取方法包括如下步骤:
1)取配方量的青叶胆洗净、粉碎,放置于50-70℃温水中减压浸提两次,每次浸提1-2h,青叶胆与50-70℃温水的固液比为1:10-12,浸提真空度为0.7-0.9Mpa,合并各次浸提液,得青叶胆浸提液;
2)取配方量的香附、蔓荆子和薤白放置于浓度为40-60%的乙醇溶液中超声30-40min,香附、蔓荆子和薤白的总重量与40-60%的乙醇溶液的固液比为1:40-60,超声频率为40-60KHz,得超声提取液;
3)将步骤1)获得的青叶胆浸提液与步骤2)获得的超声提取液合并,混合均匀,浓缩干燥至粉末,即得中药提取物。
4.如权利要求1所述的宫内膜干细胞保护液,其特征在于,所述保护液还包括重量份数为4-10份的维生素B6、2-4份的氯化镁和10-20份的N-乙酰半胱氨酸。
5.如权利要求1所述的宫内膜干细胞保护液,其特征在于,所述保护液还包括重量份数为0.4-0.6份的超氧化物歧化酶、3-7份的LpxC-1和0.8-1.2份的柠檬酸锌。
6.如权利要求1所述的宫内膜干细胞保护液,其特征在于,所述保护液还包括重量份数为4-8份的磷酸氢二钾、1-5份的妥布霉素和0.2-1份的甘油。
7.一种权利要求1所述的宫内膜干细胞保护液的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:
S1:取1/2配方量的水,将配方量的肝素钙以4-8s/d的速度加入搅拌状态的水中,滴加完毕后继续以400-500r/min的速度搅拌25min,用细菌过滤器过滤,得肝素钙水溶液;
S2:将配方量的低分子右旋糖苷、罂粟碱和海藻糖放置于剩余配方量的水中以800-1000r/min的速度搅拌4-6min,用细菌过滤器过滤,获得混合水溶液;
S3:将步骤S1获得的肝素钙水溶液和步骤S2获得的混合水溶液混合均匀后加入配方量的中药提取物,再次混合均匀,冰水浴降至0℃,即得。
8.权利要求1-7任一所述的宫内膜干细胞保护液在保存宫内膜干细胞中的应用。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,每mL所述保护液中保存的宫内膜干细胞的数量为7~9×105个。
10.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述保护液的工作温度为-20~-80℃。
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