[发明专利]检测FHV-1病毒的引物、核酸捕获金标试纸条、试剂盒及应用

说明书

本发明公开了一种检测FHV‑1病毒的引物、核酸捕获金标试纸条、试剂盒及应用。所述检测FHV‑1病毒的引物对包括第一引物和第二引物，其序列分别如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。所述金标试纸条包括衬板，所述衬板的上端面包括沿设定方向依次设置的样品垫、结合有FITC金标抗体的金标结合垫、包被膜及吸水垫，所述包被膜上设置有结合地高辛抗体的隐形检测区和结合羊抗鼠二抗的隐形对照区。所述试剂盒包括前述引物对和核酸捕获金标试纸条。本发明检测FHV‑1病毒的检测方法特异性高、灵敏度高、准确、快速，应用前景广阔。

技术领域

本发明涉及分子生物学技术领域，尤其涉及一种PCR扩增结合核酸分子捕获技术，检测FHV-1病毒的引物、核酸捕获金标试纸条，相应的试剂盒及其检测应用。

背景技术

猫疱疹病毒(FHV-1)是属于大型的病毒(100～130nm直径)，具有封套及双股的DNA，于细胞核内进行增殖，并形成核内包涵体。

猫病毒性鼻气管炎是由猫疱疹病毒引起的一种上呼吸道传染疾病，在猫与猫之间互相传播，死亡率极高，早期的临床症状包括：沉郁、打喷嚏和咳嗽，接着就出现畏光、结膜炎、和浆液性的眼和鼻分泌物，体温并且快速地提升，阵发性的打喷嚏、深部的气管咳嗽、舌头和上颔的溃疡等症状也常发生；如果再有细菌的继发性感染，那么眼和鼻的分泌物就会呈现脓状。慢性感染的病例可能会出现慢性鼻窦炎、溃疡性角膜炎和全眼炎，年轻的仔猫感染可能会造成严重的结膜炎，溃疡性的角膜炎最后可能导致全眼炎和失明。因此，建立FHV-1快速检测方法在猫病害筛查和控制上显得尤为重要。

目前检测FHV-1的常见方法有：酶联免疫法，但是该方法灵敏度低，假阳性高，易造成误检；荧光定量PCR法，该方法灵敏度较高，但仪器成本投入较大，对操作人员要求较高。此外，还有斑点杂交法、southern杂交法等，但这些方法假阳性高，操作繁琐，耗时较长。

发明内容

本发明的主要目的就是针对以上现状，提供一种用于FHV-1 PCR扩增和核酸捕获的特异性引物，以克服现有技术中的不足。

本发明的另一主要目的在于提供一种FHV-1核酸捕获金标试纸条。

本发明的另一目的还在于提供一种用于FHV-1 PCR扩增和核酸捕获的试剂盒。

本发明的另一目的还在于提供前述试剂盒在制备检测FHV-1病毒的产品中的用途。

本发明的另一目的还在于提供一种包含前述的用于FHV-1 PCR扩增和核酸捕获的试剂盒的产品。

为实现前述发明目的，本发明采用的技术方案包括：

本发明实施例提供了一种检测FHV-1病毒的引物对，其包括第一引物和第二引物，所述第一引物、第二引物的序列分别如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。

进一步地，所述引物对的上游引物的5’和下游引物的5’都经生物素标记。

进一步地，所述上游引物标记的生物素为地高辛，所述下游引物标记的生物素为异硫氰酸。

本发明实施例还提供了一种检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条，包括衬板，所述衬板的上端面包括沿设定方向依次设置的样品垫、结合有FITC金标抗体的金标结合垫、包被膜及吸水垫，所述包被膜上设置有结合地高辛抗体的隐形检测区和结合羊抗鼠二抗的隐形对照区。

本发明实施例还提供了一种检测FHV-1病毒的试剂盒，其包括至少一引物对和至少一核酸捕获金标试纸条，其中一引物对为前述的检测FHV-1病毒的引物对，其中一核酸捕获金标试纸条为前述的检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条。

本发明实施例还提供了前述的检测FHV-1病毒的试剂盒于制备检测FHV-1病毒的产品中的用途。