[发明专利]检测FHV-1病毒的引物、核酸捕获金标试纸条、试剂盒及应用

权利要求书

1.一种检测FHV-1病毒的引物对，其特征在于包括第一引物和第二引物，所述第一引物、第二引物的序列分别如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示。

2.根据权利要求1所述的检测FHV-1病毒的引物对，其特征在于：所述引物对的上游引物的5’和下游引物的5’都经生物素标记；优选的，所述上游引物标记的生物素为地高辛，所述下游引物标记的生物素为异硫氰酸。

3.一种检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条，包括衬板，其特征在于：所述衬板的上端面包括沿设定方向依次设置的样品垫、结合有FITC金标抗体的金标结合垫、包被膜及吸水垫，所述包被膜上设置有结合地高辛抗体的隐形检测区和结合羊抗鼠二抗的隐形对照区。

4.根据权利要求3所述的检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条，其特征在于还包括第一保护膜和第二保护膜，所述第一保护膜的至少局部区域覆设于所述样品垫和金标结合垫上，所述第二保护膜的至少局部区域覆设于所述吸水垫上；优选的，所述第一保护膜的上表面设置有样品标记线；

和/或，所述检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条还包括外壳，所述外壳包括相互配合连接的底座和面板，所述底座包括定位槽，所述衬板卡设于所述定位槽内，所述面板上开设有观察窗和加样孔，所述观察窗与所述包被膜的位置对应，所述加样孔与所述样品垫的位置对应；优选的，所述底座的上端面设置有凸条，所述面板与底座相配合的一面上开设有与所述凸条相配合的凹槽，所述凸条与凹槽能够插接相连，实现底座和面板的连接。

5.根据权利要求3所述的检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条，其特征在于：所述包被膜上的隐性检测区和隐形对照区均为线条型；和/或，所述衬板包括硬质PVC塑胶条；和/或，所述样品垫包括聚酯膜；和/或，所述包被膜包括硝酸纤维素膜；和/或，所述吸水垫包括滤纸或滤油纸。

6.一种检测FHV-1病毒的试剂盒，其特征在于包括至少一引物对和至少一核酸捕获金标试纸条，其中一引物对为权利要求1或2所述的检测FHV-1病毒的引物对，其中一核酸捕获金标试纸条为权利要求3-5中任一项所述的检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条。

7.如权利要求6所述的试剂盒，其特征在于还包括PCR扩增检测的常规组件；优选的，所述PCR扩增检测的常规组件包括PCR反应用缓冲液、三磷酸碱基脱氧核苷酸混合液和DNA聚合酶。

8.权利要求6-7中任一项所述的检测FHV-1病毒的试剂盒于制备检测FHV-1病毒的产品中的用途。

9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，应用所述产品检测FHV-1病毒的方法包括：

提供权利要求1或2所述的检测FHV-1病毒的引物对和阳性样本；

使所述引物对与权利要求6-7中任一项所述的检测FHV-1病毒的试剂盒的PCR扩增检测的常规组件混合，形成混合液；

在所述混合液中加入待检测的DNA样本或阳性样本；

之后对所述混合液进行PCR扩增；

将所获PCR扩增产物加入权利要求3-5中任一项所述的检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条进行检测，根据显色结果判断待检测的DNA样本中是否包含FHV-1病毒；

优选的，所述FHV-1病毒PCR扩增的条件为：

预变性，包括：在92～95℃下变性保温5～10min；

PCR循环，包括30～40个循环，每个循环包括：依次在92～95℃下变性保温30s～1min，55～60℃退火保温30s～1min，70～75℃延伸保温1～2min；

其后，在70～75℃延伸保温5～10min。

10.一种包含权利要求6-7中任一项所述的检测FHV-1病毒的试剂盒的产品，所述产品应用于FHV-1病毒的检测方法，所述检测方法包括：

提供权利要求1或2所述的检测FHV-1病毒的引物对和阳性样本；

使所述引物对与权利要求6-7中任一项所述的检测FHV-1病毒的试剂盒的PCR扩增检测的常规组件混合，形成混合液；

在所述混合液中加入待检测的DNA样本或阳性样本；

之后对所述混合液进行PCR扩增；

将所获PCR扩增产物加入权利要求3-5中任一项所述的检测FHV-1病毒的核酸捕获金标试纸条进行检测，根据显色结果判断待检测的DNA样本中是否包含FHV-1病毒；

优选的，所述FHV-1病毒PCR扩增的条件为：

预变性，包括：在92～95℃下变性保温5～10min；

PCR循环，包括30～40个循环，每个循环包括：依次在92～95℃下变性保温30s～1min，55～60℃退火保温30s～1min，70～75℃延伸保温1～2min；

其后，在70～75℃延伸保温5～10min。