[发明专利]一种阻断Th17信号通路治疗自身免疫病的间充质干细胞及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种阻断Th17信号通路治疗自身免疫病的间充质干细胞，所述间充质干细胞借助基因修饰高表达抗IL‑23单链抗体与IgG1的Fc片段的αIL23:Fc融合蛋白。所述αIL23:Fc融合蛋白可竞争性抑制IL‑23与其受体的结合，从而可用于抑制IL‑23介导的炎症相关信号通路以及炎症反应。本发明还公开了所述间充质干细胞的制备方法和应用。

技术领域

本发明涉及一种阻断Th17信号通路治疗自身免疫病的间充质干细胞及其制备方法和应用，属于生物医药领域。

背景技术

人白介素23(hIL-23)由树突状细胞(DC细胞)、巨噬细胞或其他抗原递呈细胞分泌，是由p19和p40两个亚基以二硫键相连接组成的异二聚体结构的致炎因子[1]。IL-23与IL-12共有p40亚基,其编码基因位于人的5号染色体上；而p19为IL23特有亚单位蛋白，编码基因位于人的12号染色体上。研发发现[2]，IL23通过与其受体(IL-23R)结合，从而介导机体众多炎症反应。

IL-23R同样为异质二聚体结构,由与IL-12R共有的IL-12Rβ1亚单位(其与IL-12p40亚单位相结合),及自身特有的IL-23R亚单位(与IL23p19亚单位相结合)共同构成。编码IL-12Rβ1亚单位的基因位于人的19号染色体上；编码IL-23R亚单位的基因位于人的1号染色体上[3]。IL-12Rβ1亚单位在T细胞、NK细胞(natural killer cells，自然杀伤细胞)、DC细胞有表达。IL-23R亚单位主要表达于特定的Th17细胞,另有少量表达于B细胞和固有淋巴细胞[4]。IL-23可结合Th17细胞表面的IL23受体(IL-23R)，活化JAK激酶并使IL23受体结构域酪氨酸磷酸化，进一步激活下游STAT、MAPK等信号通路，从而激活Th17细胞，使其分泌IL-17A、IL-17F、IL-22等炎症因子[5]，而IL-17A/F(白细胞介素-17A/F)的分泌可激活效应细胞的NF-kB等炎症信号通路，从而引起下游一系列炎症因子(包括TNF-a、IL-1β及IL-6等)释放和炎症发生[6,7]；IL-17A/F也可通过诱导趋化因子的释放来诱导中性粒细胞募集至炎症部位，刺激前列腺素和金属蛋白酶产生、以及抑制蛋白多糖合成，同时IL-17A可进一步促进趋化因子CCL20、CXCL1、CXCL3、CXCL5、CXCL6、CXCL8及VEGF等分泌，进而导致免疫细胞异常分化、过度增殖和免疫细胞的激活[6,8]。

研究发现[2,9]，通过阻断IL-23与其受体结合，可有效降低炎症性肠病、银屑病等众多自身免疫性疾病的发生。而最新开发的治疗自身免疫性疾病(如炎症性肠病、银屑病及类风湿性关节炎等)的新药中，Ustekinumab(优特克诺单抗)，Guselkumab及Tildrakizumab等单抗药物均针对IL-23/Th17信号通路而研发，通过阻断IL-23及其受体的结合从而抑制IL-23/Th17轴介导的组织器官的炎症反应，达到治疗炎症性肠病或银屑病的目的[10-13]。其中Ustekinumab单抗是靶向IL-12和IL-23的p40共同亚基的人源化单克隆抗体[14],而Guselkumab和Tildrakizumab单抗则是靶向IL-23p19亚基[11]，从而抑制IL23p19亚基与其受体IL23R之间的结合，阻断Th17细胞下游激活信号。然而临床研究也发现，用上述单抗治疗病人时有少数患者出现严重不良事件，包括冠状动脉疾病，充血性心力衰竭，病毒综合征，尿路感染，手术伤口蜂窝织炎和肝酶水平升高，这种不良反应更多发于高血糖、高血压及高血脂的病人[14]。另外，上述抗体在使用过程中在部分病人(4％)血清中检测出抗单抗的抗体[14]，提示靶向药物的耐药性仍是单抗药物无法突破的难题。

基于此，亟需一种新的途径解决上述单抗的不足，用于制备治疗自身免疫性疾病(如炎症性肠病、银屑病及类风湿性关节炎等)的药物。

发明内容