[发明专利]一种阻断Th17信号通路治疗自身免疫病的间充质干细胞及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种阻断Th17信号通路治疗自身免疫病的间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞借助基因修饰高表达抗IL-23单链抗体与IgG1的Fc片段的αIL23:Fc融合蛋白，所述抗IL-23单链抗体包含IL-2信号肽结构、IL23-VL、Linker和IL23-VH；所述IgG1的Fc片段包括IgG1的CH2、CH3以及铰链区；所述IL-2信号肽的氨基酸序列为SEQ No:1所示序列；所述IL23-VL的氨基酸序列为SEQ No:2所示序列；所述Linker的氨基酸序列为SEQ No:3所示序列；所述IL23-VH的氨基酸序列为SEQ No:4所示序列；所述铰链区的氨基酸序列为SEQ No:5所示序列；所述CH2的氨基酸序列为SEQ No:6所示序列；所述CH3的氨基酸序列为SEQ No:7所示序列。

2.根据权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述基因修饰采用的技术为病毒转染、脂质体转染、电转移、基因编辑或mRNA转染的技术。

3.根据权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述基因修饰为病毒转染技术。

4.根据权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述基因修饰为慢病毒转染技术。

5.根据权利要求1中所述的间充质干细胞，其特征在于，所述基因修饰为第四代慢病毒转染技术。

6.根据权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞为骨髓组织、脂肪组织、脐带组织或胎盘组织来源的间充质干细胞。

7.根据权利要求1所述的间充质干细胞，其特征在于，所述间充质干细胞为人脐带间充质干细胞。

8.一种根据权利要求1-7任一项中所述的间充质干细胞的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

(1)利用病毒载体系统构建αIL23:Fc融合蛋白病毒表达质粒，

(2)将所述αIL23:Fc融合蛋白病毒表达质粒导入293T细胞，收获病毒；以及

(3)将收获的病毒转染至间充质干细胞，筛选被病毒转染的间充质干细胞，其高表达抗IL-23单链抗体与IgG1的Fc片段的αIL23:Fc融合蛋白。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

(1)利用第四代慢病毒载体系统构建αIL23:Fc融合蛋白慢病毒表达质粒；

(2)将所述αIL23:Fc融合蛋白慢病毒表达质粒分别与慢病毒pGag/Pol、pRev、pVSV-G框架质粒混合，通过LTX脂质体导入293T细胞，包装得到成熟慢病毒，收获病毒；以及

(3)将收获的病毒转染至间充质干细胞，24h后加入嘌呤霉素筛选被病毒转染的间充质干细胞，其高表达抗IL-23单链抗体与IgG1的Fc片段的αIL23:Fc融合蛋白。