[发明专利]亚香棒虫草胞内多糖的制备方法及其应用

说明书

本公开提供了亚香棒虫草胞内多糖的制备方法及其应用。其制备方法，包括步骤：1)菌种活化；2)扩大培养；3)发酵培养；4)胞内粗多糖的提取；5)胞内粗多糖的提纯。值得的亚香棒虫草胞内多糖在对乳腺癌细胞(MCF‑7)、神经母癌细胞(SH‑SY5Y)或肺腺癌细胞(A549)都有显著抑制作用。该制备方法能够高效提取亚香棒虫草胞内多糖，有助于为后续研究用虫草多糖与治疗癌症提供充足的支撑。同时，还经过试验证明所述亚香棒虫草胞内多糖可以有效抑制乳腺癌细胞、神经母癌细胞、肺腺癌细胞，为相关科研提供科学的依据。

技术领域

本发明涉及植物医药技术领域，特别涉及亚香棒虫草在抗癌领域的作用。

背景技术

随着经济的增长，人们的生活条件越来越好，但人们也逐渐发现每年因恶性肿瘤而死亡的人数也在逐渐增加，而这也推动了科研人员对于肿瘤药物的开发以及对其机制的深入研究。虫草主要由两部分构成：千尸毛“虫”和头部长出来的真菌“草”，它的各种活性成分物质具有降压及舒张血管、调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗菌、抗氧化等多种功效。冬虫夏草被称为我国的“中药之王”，位列三大补品之首，研究发现，在中国境内有100多种虫草，只有一种叫做冬虫夏草，足见其稀缺珍贵。

而随着天然产物分离纯化技术、细胞生物学、药效学和药理学的发展，天然产物抗肿瘤的研究正成为一个越来越热门的研究领域，因为它相比于化疗来治疗癌症的副作用小，比较被人们接受，一旦研究人员能够发明出一种天然活性产物制剂来治疗癌症，那对于世界的贡献不亚于工业革命或者计算机信息技术革命。虫草多糖又作为抗肿瘤活性的重要成分之一，也是引起越来越多的研究学者关注的原因之一。虫草多糖也是国际医学上公认的人体免疫增强剂，它可以调节机体的免疫功能，增强体液免疫和细胞免疫，从而提高机体的免疫力。

同时，人们也逐渐发现，有些虫草的化学成分及药理作用与冬虫夏草相似，例如：古尼虫草、蛹虫草、凉山虫草、巴西虫草、亚香棒虫草等，他们都可替代冬虫夏草入药，并对人体产生相同的功效。

亚香棒虫草(Cordyceps hawkesii Gray.)又称霍克斯虫草，虫体外面灰黄色，“草部”呈淡灰色至灰黑色，亚香棒虫草比较脆而且容易折断，气微香，味淡，其主要靠寄生鳞翅目蝙蝠蛾科棒蝠蛾属(Napialus)幼虫来生长。在成分和功能作用上与冬虫夏草十分接近，因此有些地方直接用亚香棒虫草代替冬虫夏草食用，具有止咳、化痰、定喘、安神、益精气及益肾壮阳等功效。

虫草多糖是亚香棒虫草中含量最高的活性物质，它是一类高分子化合物，构造复杂，且拥有广泛的药理作用，引发越来越多的研究学者关注。虫草多糖是国际医学上公认的人体免疫增强剂，作用效果良好，可以调节机体的免疫功能，增强体液免疫和细胞免疫，从而提高机体的免疫力。多糖是组成生物体的四大主要物质之一，普遍存在于各类生物中，多糖由单糖分子以糖苷键结合而成的，在生物体内扮演着重要角色，具有多方面的生物活性。

发明内容

本公开的目的在于提供了亚香棒虫草胞内多糖(BN)的制备方法。

亚香棒虫草胞内多糖的制备方法，包括以下步骤：

1)菌种活化：制备马铃薯平板培养基并接种亚香棒菌丝体菌25℃培养三天；

2)扩大培养：制备马铃薯液体培养基，从活化培养所得的亚香棒菌丝体菌中选取生长良好的菌丝进行接种，振荡培养十天；

3)发酵培养：制备发酵培养基，从扩大培养基中挑取生长良好的菌种进行接种，振荡培养十天；

4)胞内粗多糖提取：将发酵培养所得的亚香棒菌丝体菌进行抽滤，所得菌丝烘干后液氮研磨，然后加入乙醇进行超声浸提，浸提液离心后收集上清液；

5)胞内粗多糖的提纯：向上清液加入3-4倍上清液体积的85％的乙醇，沉淀后过滤，再用乙醚清洗固体，过滤，得到亚香棒虫草胞内多糖。