[发明专利]亚香棒虫草胞内多糖的制备方法及其应用

权利要求书

1.亚香棒虫草胞内多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)菌种活化：制备马铃薯平板培养基并接种亚香棒菌丝体菌25℃培养三天；

2)扩大培养：制备马铃薯液体培养基，从活化培养所得的亚香棒菌丝体菌中选取生长良好的菌丝进行接种，振荡培养十天；

3)发酵培养：制备发酵培养基，从扩大培养基中挑取生长良好的菌种进行接种，振荡培养十天；

4)胞内粗多糖提取：将发酵培养所得的亚香棒菌丝体菌进行抽滤，所得菌丝烘干后液氮研磨，然后加入乙醇进行超声浸提，浸提液离心后收集上清液；

5)胞内粗多糖的提纯：向上清液加入3-4倍上清液体积的85％的乙醇，沉淀后过滤，再用乙醚清洗固体，过滤，得到胞内多糖。

2.根据权利要求1所述的亚香棒虫草胞内多糖的制备方法，其特征在于，所述马铃薯平板培养基由以下步骤制得：将马铃薯洗干净，去皮后称取200g，并将其切碎，加入1000ml水，煮30min，用四层纱布过滤得马铃薯液；加入蛋白胨1％，磷酸氢二钾0.05％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.1％，琼脂1.8％，边搅拌边煮沸，直到蛋白胨和葡萄糖完全溶解，再加入200μg/ml抗生素，待冷却45℃左右，倒平板。

3.根据权利要求1所述的亚香棒虫草胞内多糖的制备方法，其特征在于，所述马铃薯液体培养基由以下步骤制得：将马铃薯洗干净，去皮后称取200g，并将其切碎，加入1000ml水，煮30min，用四层纱布过滤得马铃薯液；加入蛋白胨1％，磷酸氢二钾0.05％，葡萄糖2％，磷酸二氢钾0.05％，硫酸镁0.1％，200μg/ml抗生素，杀菌锅灭菌。

4.根据权利要求1所述的亚香棒虫草胞内多糖的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基由以下步骤制得：按葡萄糖10g/L，蔗糖25g/L，麦芽糖5g/L，蛋白胨4g/L,硝酸铵3g/L，硫酸镁0.8g/L，磷酸氢二钾0.4g/L，磷酸二氢钾0.4g/L，硫酸亚铁1.4g/L，维生素B10.03g/L,甘氨酸0.8g/L，玉米粉10g/L,酵母粉4g/L和豆粕4g/L加入水中，杀菌锅杀菌。

5.亚香棒虫草胞内多糖在抑制乳腺癌细胞、神经母癌细胞或肺腺癌细胞中的应用。