[发明专利]群体感应抑制剂筛选方法和应用在审
| 申请号： | 201811294609.9 | 申请日： | 2018-11-01 |
| 公开（公告）号： | CN109306369A | 公开（公告）日： | 2019-02-05 |
| 发明（设计）人： | 岳美娥;蔺巧燕 | 申请（专利权）人： | 青岛科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/34 | 分类号： | C12Q1/34 |
| 代理公司： | 青岛中天汇智知识产权代理有限公司 37241 | 代理人： | 郝团代 |
| 地址： | 266000 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 群体感应抑制剂 筛选 群体感应系统 食品防腐保鲜 产物峰面积 混合化合物 中药粗提液 电泳 策略提供 酶抑制剂 试剂消耗 水解底物 一步反应 直接测定 毛细管 酶催化 靶点 酶活 应用 自动化 分析 中介 | ||
【权利要求书】：
1.一种群体感应抑制剂的筛选方法，其特征是采用电泳中介微分析技术，在毛细管中用酶催化水解底物的一步反应，然后在紫外200 nm处直接测定产物峰面积实现酶活的测定和酶抑制剂的筛选方法；
所述的酶为5＇-甲硫腺苷核苷酶（MTAN）；
所述的底物为5＇-甲硫腺苷（MTA）；
所述的产物为腺嘌呤。
2.根据权利要求1所述的一种群体感应抑制剂的筛选方法，其特征在于：
1）将反应缓冲液、酶溶液和底物溶液分别以1-100纳升体积依次导入经过分离缓冲液处理过的毛细管，所述的酶的浓度范围为0-100μg/mL，底物的浓度范围为0-100μg/mL，所述的底物溶液含或不含待筛选化合物；
2）使酶和底物反应0-14分钟；
3）加上1千伏至30千伏电压进行电泳分离；酶活用210nm处产物峰面积表示；
所述的缓冲液是pH为2.5-7缓冲液。
3.根据权利要求2所述的一种群体感应抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的反应缓冲液是pH为3-7缓冲液，所述的分离缓冲液是pH为2.5-6.5缓冲液。
4.根据权利要求2所述的一种群体感应抑制剂的筛选方法，其特征在于：所述的缓冲液是磷酸-氢氧化钠缓冲液和HEPES的缓冲液。
5.根据权利要求1或2所述的一种群体感应抑制剂的筛选方法的应用，其特征在于：可用于中药粗提液和合成小分子化合物中群体感应抑制剂的筛选。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于青岛科技大学，未经青岛科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811294609.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
