[发明专利]一种同时检测茶叶中6种合成甜味剂的方法有效
| 申请号: | 201811286658.8 | 申请日: | 2018-10-31 |
| 公开(公告)号: | CN109490452B | 公开(公告)日: | 2021-03-09 |
| 发明(设计)人: | 王晨;诸力;刘新;鲁成银 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院茶叶研究所 |
| 主分类号: | G01N30/88 | 分类号: | G01N30/88;G01N30/06 |
| 代理公司: | 浙江千克知识产权代理有限公司 33246 | 代理人: | 冷红梅 |
| 地址: | 310008 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 同时 检测 茶叶 合成 甜味剂 方法 | ||
1.一种同时检测茶叶中6种合成甜味剂的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:
(1)样品提取:称取2g粉碎后的茶叶样品于离心管,加入20 mL体积比1:1的乙腈、水混合溶液,在振荡器上振荡30分钟,离心,得上清液A备用;
(2)样品净化:取步骤(1)的上清液A 1.00 mL至含有吸附剂的离心管中,涡旋振荡1分钟,离心,取1 mL上清液B经0.22μm滤膜过滤,所得滤液作为样品溶液,待液相色谱-串联质谱仪检测;所述吸附剂为下列之一:200 mg石墨化炭黑、50 mg多壁碳纳米管、100 mg石墨化炭黑与25 mg多壁碳纳米管的混合;
(3)将步骤(2)所得样品溶液进行液相色谱-串联质谱仪检测,得样品溶液的液相色谱图,色谱条件为:使用以C18为填料的色谱柱,梯度洗脱,流速0.25 mL/min,流动相A为含体积分数0.1%的甲酸和1mmol/L甲酸铵的甲醇溶液,流动相B为含体积分数0.1%甲酸和1mmol/L甲酸铵的水溶液;质谱条件为:离子源为电喷雾离子源,扫描方式为多反应监测,离子源极性为负离子;
所述梯度洗脱的程序为:
初始流动相B的体积分数为90%,保持1分钟;然后在7分钟内变换流动相B的体积分数为10%,保持2分钟;再在0.1分钟内变换流动相B的体积分数为90%,保持3.9分钟;
(4)配制标准溶液
以不含6种目标合成甜味剂的空白茶叶样品经步骤(1)和(2)处理获得空白样品溶液,取甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、阿斯巴甜、阿力甜或纽甜的标准品用水配制标准溶液,然后用空白样品溶液稀释标准溶液,得到不同标准品浓度的基质匹配标准溶液,所述基质匹配标准溶液中空白样品溶液的体积占比不低于95%,将基质匹配标准溶液按步骤(3)相同条件进行液相色谱-串联质谱仪检测,得基质匹配标准溶液的液相色谱图,分别对各个标准品,按照其浓度和峰面积,绘制得到6种标准品的标准曲线;
(5)根据步骤(3)样品溶液的液相色谱图中各待测成分的峰面积及其对应的标准品的标准曲线,计算出样品溶液中各待测成分的浓度,并换算得到茶叶样品中甜味剂含量。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(3)中,质谱条件为:气帘气压力为35psi,碰撞气压力为7 psi,离子喷雾电压为-4500V,离子源温度为500℃,雾化气压力为50psi,辅助气压力为50 psi。
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