[发明专利]怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法

说明书

本发明公开了一种怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法，以怀远玉石籽石榴的茎尖、茎段及叶片为外植体，灭菌条件为0.1％HgCl₂，10min，愈伤组织诱导的培养基为MS+6‑BA 2.0mg/L+NAA 1.0mg/L+35g蔗糖+5.5g琼脂，诱导芽的培养基为WPS+6‑BA 1.0mg/L+35g蔗糖+5.5g琼脂，生根诱导培养基为WPS+IBA 0.8mg/L+35g蔗糖+5.5g琼脂。本发明的培育方法有利于培养高质量的石榴种苗，提高石榴结果的数量和质量。

技术领域

本发明涉及果蔬培育技术领域，尤其涉及一种怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法。

背景技术

怀远石榴(Punicaceae，Punica L.)(石榴科(Punicaceae)石榴属(Punica L.)植物)种类繁多、栽培历史悠久、品质优异，久负盛名，是安徽省重要的经济果树之一。

玉石籽石榴(white peel pomegranate cultivar)是安徽省怀远县主栽的优良石榴品种之一，是石榴中唯一一种白花、白籽、白实的品种。其果实品质佳，含糖量高，口味纯正，在国内外有较高的知名度。但在目前白花玉石籽石榴的繁殖始终局限于传统的是扦插、分株等方法，易出现病株、弱株、易早衰、提前减产和品种退化现象等诸多问题；另外在依靠扦插进行推广优良品种的过程中由于受到季节及外界环境等客观因素的制约，不能形成工厂化、标准化生产，导致优质种苗少，价格高，推广受限,并且石榴品种繁育时间长，效率较低。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法，可以缩短植物的繁殖周期，避免了外界的光、水、养分和菌落的差异，有效的统一了植物的培养环境，避免外界干扰，有利于培养高质量的石榴种苗。

本发明的技术方案如下：

一种怀远白花玉石籽石榴无性快速培育方法，包括如下步骤：

1)外植体选择及预处理：选择健壮的无病虫害玉石籽石榴的新生腋芽、嫩茎段及新生叶片，作为组织培养的外植体，用流水冲洗10min后采用10mg/L GA₃浸泡30min后备用；

2)外植体接种：

腋芽接种：取10mg/L GA₃浸泡好的腋芽用75％酒精浸泡30sec后移入超净工作台，在超净工作台上，先用无菌水冲洗3遍，再用解剖针剥去芽鳞，后用0.1％HgCl₂消毒8min，无菌水冲洗5遍后切去腋芽下方木质部，接种于初代腋芽接种培养基上；

茎段接种：取10mg/L GA₃浸泡好的茎段用75％酒精浸泡30sec后移入超净工作台，在超净工作台上，先用无菌水冲洗3遍，后用0.1％HgCl₂消毒5min，无菌水冲洗5遍，切长1.0-1.5cm、只含1个节点的茎段，接种在初代茎段培养基上；

叶片接种：取10mg/L GA₃浸泡好的叶片用75％酒精浸泡30sec后移入超净工作台，在超净工作台上，先用无菌水冲洗3遍，后用0.1％HgCl₂消毒3min，无菌水冲洗5遍，将叶片切成1.0×1.0cm²小块，并将叶片背面划伤，将背面贴向培养基，接种于初代叶片接种培养基上；

3)增殖培养：上述腋芽接种25d、茎段接种20d、叶片接种40d后，将生长好外植体取切成1.5-2cm茎段，每段含有1-2个茎节，接种于增殖培养基中，在培养室培养35-40d；

4)生根培养：上述外植体增殖培养35-40d后，将外植体切除底部愈伤，然后接种于生根培养基中，在培养室培养45d；

5)炼苗：打开组培瓶盖，进行炼苗，炼苗时间为3-5d；