[发明专利]一种组合微生物分段固体发酵生产生物饲料的方法

说明书

本发明公开了一种组合微生物分段固体发酵生产生物饲料的方法，本发明采用霉菌、酵母菌、芽孢菌与乳酸菌分段组合，以棉饼粕为主要基质进行固体发酵，获得一种低游离酚，富含益生菌、蛋白质、小分子肽、乳酸、生物酶等和利于动物消化吸收的棉饼粕生物发酵饲料，按照本发明的比例制得的发酵饲料中游离棉酚为29mg/kg，小分子肽含量18.7％，氨基酸态氮含量为1.95％，粗蛋白含量37.1％，较起始培养基粗蛋白含量提高42％以上，乳酸菌数为3.7亿cfu/g，芽孢菌数为53亿cfu/g，蛋白酶活力267u/g糖化酶活力390u/g，纤维素酶活力1.9umol/g。

技术领域

本发明涉及一种生物饲料生产领域，具体是一种组合微生物分段固体发酵生产生物饲料的方法。

背景技术

我国蛋白饲料资源严重匮乏，自给率不足50％，植物饼粕类是用量最大的蛋白饲料。而我国是棉花种植大国，也是棉饼粕的供应大国，尽管其蛋白含量达到30-40％，且氨基酸成分较全，并含有糖、脂肪、磷脂、维生素与纤维素等，但因其含有游离棉酚，使其利用率不到30％。为了提高棉饼粕的利用率，去除棉饼粕游离酚，消除其抗营养因子，拟采用霉菌、酵母菌、芽孢菌与乳酸菌分段组合，以棉饼粕为主要基质进行固体发酵，以获得一种低游离酚，富含益生菌、蛋白质、小分子肽、乳酸、生物酶等和利于动物消化吸收的棉饼粕生物发酵饲料。

发明内容

本发明的目的在于提供一种组合微生物分段固体发酵生产生物饲料的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种组合微生物分段固体发酵生产生物饲料的方法，其具体生产步骤如下：

S1、菌种培养：

一、黑曲霉和绿色木霉培养：取500g的麸皮，麸皮清洗干净后进行脱水烘干，烘干至麸皮的含水量为50％，麸皮烘干后，将其分装若干个在500ml的三角瓶中，每个三角瓶中装50g的麸皮，三角瓶的瓶口封口置入灭菌锅中进行灭菌，灭菌锅里面的温度控制在120-122℃，当灭菌锅里面的温度山上升至规定温度时，三角瓶在灭菌锅里面保温40min，之后将其取出，待三角瓶的温度自然冷却至室温后，分别接入黑曲霉和绿色木霉斜面菌种，其中黑曲霉和绿色木霉各接种5瓶；然后将接种完成的三角瓶放入培养箱培养，培养箱中的温度控制在28-30℃，三角瓶里面的黑曲霉和绿色木霉菌种在培养箱里面培养7天，每天对麸皮翻面一次，至培养基长满孢子，然后向每瓶三角瓶中加入100ml的无菌水制成孢子悬浮液备用；

二、酵母菌培养：取酵母膏6g，蛋白胨12g，葡萄糖12g，将它们全部溶于600ml的水中，然后将溶液平均分装到250ml的三角瓶中，每个三角瓶中装有50ml的溶液，之后对三角瓶封口放入灭菌锅中灭菌，灭菌锅里面的温度控制在114-116℃，当灭菌锅里面的温度山上升至规定温度时，三角瓶在灭菌锅里面保温25min后取出，待三角瓶的温度冷却后接入酵母斜面菌种，然后将三角瓶置于摇床机里面培养，摇床机里面的温度控制在29-31℃，摇床的转速为180rpm,三角瓶里面的酵母菌在摇床机里面培养24h，取出备用；

三、枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌培养：取豆粕粉30g，玉米淀粉20g，葡萄糖5g，硫酸锰0.2g，将它们全部溶解到1000ml的水中，然后将溶液分装到500ml的三角瓶中，每个三角瓶中装100ml的溶液，三角瓶封口后置于灭菌锅进行灭菌，灭菌锅里面的温度在120-122℃，当灭菌锅里面的温度达到规定温度后，三角瓶在灭菌锅里面保温25min取出，待其自然冷却至室温后接入枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌斜面菌种，其中枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌各接种5瓶；然后将接种好的三角瓶放入摇床机里面进行摇床培养，摇床培养的温度控制在34-36℃，转速控制在180rpm,三角瓶里面的枯草芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌，在摇床机里面培养12h之后取出备用；