[发明专利]用于高血压相关药物基因多态性位点检测的引物组、试剂盒和方法有效
申请号: | 201811272890.6 | 申请日: | 2018-10-29 |
公开(公告)号: | CN109182509B | 公开(公告)日: | 2022-05-06 |
发明(设计)人: | 朱阳进;孔繁仁;严慧;胡昌明;赵薇薇;于世辉 | 申请(专利权)人: | 广州金域医学检验集团股份有限公司;广州金域医学检验中心有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12N15/11 |
代理公司: | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人: | 齐云 |
地址: | 510000 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 高血压 相关 药物 基因 多态性 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于高血压相关药物基因多态性位点检测的引物组,其特征在于,其包括引物组合1-引物组合19;
其中,引物组合1为:SEQ ID NO.1-2所示的扩增引物和SEQ ID NO.40所示的检测引物;
引物组合2为:SEQ ID NO.3-4所示的扩增引物和SEQ ID NO.41所示的检测引物;
引物组合3为:SEQ ID NO.5-6所示的扩增引物和SEQ ID NO.42所示的检测引物;
引物组合4为:SEQ ID NO.7-8所示的扩增引物和SEQ ID NO.43所示的检测引物;
引物组合5为:SEQ ID NO.9-10所示的扩增引物和SEQ ID NO.44所示的检测引物;
引物组合6为:SEQ ID NO.11-12所示的扩增引物和SEQ ID NO.45所示的检测引物;
引物组合7为:SEQ ID NO.13-14所示的扩增引物和SEQ ID NO.46所示的检测引物;
引物组合8为:SEQ ID NO.15-16所示的扩增引物和SEQ ID NO.47所示的检测引物;
引物组合9为:SEQ ID NO.17-18所示的扩增引物和SEQ ID NO.48所示的检测引物;
引物组合10为:SEQ ID NO.19-20所示的扩增引物和SEQ ID NO.49所示的检测引物;
引物组合11为:SEQ ID NO.21-22所示的扩增引物和SEQ ID NO.50所示的检测引物;
引物组合12为:SEQ ID NO.23-24所示的扩增引物和SEQ ID NO.51所示的检测引物;
引物组合13为:SEQ ID NO.25-26所示的扩增引物和SEQ ID NO.52所示的检测引物;
引物组合14为:SEQ ID NO.27-28所示的扩增引物和SEQ ID NO.53所示的检测引物;
引物组合15为:SEQ ID NO.29-30所示的扩增引物和SEQ ID NO.54所示的检测引物;
引物组合16为:SEQ ID NO.31-32所示的扩增引物和SEQ ID NO.55所示的检测引物;
引物组合17为:SEQ ID NO.33-34所示的扩增引物和SEQ ID NO.56所示的检测引物;
引物组合18为:SEQ ID NO.35-36所示的扩增引物和SEQ ID NO.57所示的检测引物;
引物组合19为:SEQ ID NO.37-39所示的扩增引物和SEQ ID NO.58所示的检测引物。
2.一种高血压相关药物基因多态性位点检测的试剂盒,其特征在于,其包括权利要求1所述的19种引物组构成的引物组。
3.如权利要求1所述的用于高血压相关药物基因多态性位点检测的引物组或如权利要求2所述的高血压相关药物基因多态性位点检测的试剂盒在制备用于高血压相关药物基因多态性位点检测试剂中的应用,其特征在于,其包括如下步骤:
(1)使用权利要求1所述的引物组中的扩增引物对样品进行PCR扩增,得到第一扩增产物;
(2)使用权利要求1所述的引物组中的检测引物对经碱性磷酸酶处理后的第一扩增产物进行单碱基延伸反应,得到第二扩增产物;
(3)采用飞行时间质谱技术分析所述第二扩增产物的多态性。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤(1)中,进行PCR扩增的体系含有:引物组合1-引物组合19的扩增引物、Mg2+、dNTPs和Taq DNA聚合酶。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤(1)中,在步骤(1)中,进行PCR扩增的程序的退火温度为:55-57℃。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤(2)中,进行单碱基延伸反应的体系含有:引物组合1-引物组合19的检测引物和第一扩增产物。
7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤(2)中,进行单碱基延伸反应的程序的退火温度为:51-53℃,退火时间为:4-6s。
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