[发明专利]水貂激活素B蛋白及其制备与应用

说明书

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，涉及一种水貂激活素B蛋白及其制备与应用。所述的激活素B蛋白由两个水貂激活素βB亚基组成，从水貂动物中通过分子生物学技术得到其基因序列，然后在体外表达并纯化的具有生物活性的激活素B蛋白。激活素B蛋白在水貂动物中的研究还比较少，本发明分离得到了其基因序列，并提高了其高纯度蛋白的表达方法，可为相关研究提供研究基础和新的思路，大大增加了激活素B蛋白的研究与应用前景。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，涉及一种水貂激活素B蛋白及其制备与应用。

背景技术

激活素(Actvin,ACT)，又名活化素，是Vale等和Ling等首先从猪卵泡液中分离纯化出来的一种糖蛋白激素，因能与抑制素(Inhibin,INH)分别特异性促进和抑制垂体细胞分泌卵泡刺激素(Follicle Stimulating Hormone，FSH)而得名，属于转化生长因子β超家族成员。激活素主要是由卵巢颗粒细胞和胎盘合成分泌，由于其具有特异性地促进垂体细胞分泌及合成卵泡刺激素的生物学活性，因而被命名为激活素。

ACT同INH均为两个亚基构成的二聚体。ACT由β亚单位构成，包括同源二聚体ACTA(βA-βA)和ACTB(βB-βB)或异源二聚体ACTAB(βA-βB)。三种分子结构的激活素具有类似的生物学活性，其作用的特异性与其受体后信号传导的组织差异有关。其中βB亚基在雄性水貂的睾丸中表达量非常高，说明其在精子发生过程中发挥了重要功能。

水貂(Mustula Vison)是我国珍贵的毛皮动物，水貂皮是世界上“三大裘皮”之一，在国际毛皮市场上享有盛誉。水貂在动物分类学属于哺乳纲，食肉目，鼬科，鼬属，是一种小型的、经济价值非常高的毛皮动物。水貂是起源北美的，由于其带来可观的经济效益，欧洲曾经保持每年增加2500万只的饲养量。目前国内水貂的养殖量大但养殖水平低下，尤其是水貂的繁殖性能，不但产仔数少而且生活率还低。

然而，目前国内对水貂ACTB的研究还较少，尚无水貂ACTB蛋白质与cDNA序列的报道，这为进一步探讨研究水貂ACTB的功能、其表达的时空特异性、相关信号通路及对水貂繁殖力等的研究都将造成了障碍。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新颖的激活素B蛋白，并对其制备方法与功能进行了研究。

所述的激活素B蛋白由两个水貂激活素βB亚基(氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示)组成，从水貂动物中分离得到。

激活素B蛋白在水貂动物中的研究还比较少，本发明分离得到了其基因序列，并提高了其高纯度蛋白的表达方法，可为相关研究提供研究基础和新的思路，大大增加了激活素B蛋白的研究与应用前景。

ACTB可以降低LH诱导雄激素的生产，增强垂体分泌FSH的能力，在雌性动物中促进卵泡发育以及卵母细胞成熟，在雄性动物中可以提高精子活力，精子数量，提高配种能力。因此ACTB在提高水貂繁殖性能中具有广阔的应用价值。本发明还发现βB亚基在雄性水貂的睾丸中表达量非常高，说明其在精子发生过程中发挥了重要功能。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明一个实施例中水貂INHBB基因扩增结果；M.DNA相对分子质量标准(DL2000)；1.INHBB基因扩增产物；