[发明专利]水貂激活素B蛋白及其制备与应用

权利要求书

1.水貂激活素βB亚基，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.水貂激活素B蛋白，其由两个权利要求1所述的水貂激活素βB亚基组成。

3.分离的核酸，其编码权利要求1所述激活素βB亚基。

4.根据权利要求3所述的核酸，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

5.载体，其包含权利要求3或4所述的核酸。

6.根据权利要求5所述的载体，其特征在于，所述载体选自pEASY-Blunt SimpleCloning Vector和/或pcDNA4/myc-His。

7.宿主细胞，其被权利要求3或4所述的核酸或权利要求5或6所述的载体所转化。

8.根据权利要求7所述的宿主细胞，所述宿主细胞选自CHO细胞系。

9.一种制备水貂激活素βB亚基或水貂激活素B蛋白的方法，其特征在于，包括：

在培养基中培养权利要求7所述的宿主细胞，从所培养的宿主细胞中回收如此产生的蛋白。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，从所培养的宿主细胞中回收的蛋白带有his tag，所述方法还包括将所述蛋白经亲和层析柱处理。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述亲和层析柱的填充物为Ni-AgaroseResin填料。

12.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，在用所述亲和层析柱对所得蛋白进行处理时：

用含8～12mM咪唑的平衡液平衡Ni-NTA离心柱后，将含有目的蛋白的溶液与Ni-NTA离心柱接触，用含18～22mM咪唑的洗涤缓冲液洗涤Ni-NTA离心柱，再用含480～520mM咪唑的洗脱缓冲液洗脱目的蛋白。

13.权利要求1所述的水貂激活素βB亚基，或权利要求2所述的水貂激活素B蛋白在制备调节水貂生理功能的药物中的应用；

所述生理功能包括：组织细胞生长调节，免疫调节，调节神经细胞分化，调节成骨细胞功能，调节红细胞生产，提高FSH受体的表达，降低LH诱导雄激素的生产，增强垂体分泌FSH的能力，促进卵泡发育以及卵母细胞成熟，延缓卵泡闭锁和黄体化，提高精子活力，精子数量，提高雄性水貂配种能力中的一种或多种。