[发明专利]一种抗原热稳定乳液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种制备抗原热稳定乳液的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）采用醇盐水解-水热法制备氢氧化铝颗粒：将去离子水置于100 mL三口烧瓶中，加热至85℃，之后加入异丙醇铝粉末，异丙醇铝和去离子水按照1:100的摩尔比混合，搅拌反应2 h，冷却，然后将反应液放入具有聚四氟乙烯内衬的不锈钢高压容器中进行水热处理，水热反应结束后，将物料冷却，离心分离出固相产物，用去离子水洗涤3次，真空干燥后得到氢氧化铝颗粒；

（2）蛋白质的仿生矿化：

称取1.00 g步骤（1）得到的氢氧化铝颗粒，加入到20 mL柠檬酸缓冲溶液中，超声2 min使其分散均匀，得到分散有颗粒的水相悬浮液，其中水相pH值为7.5，然后将悬浮液加入到浓度为1 mg/mL 的OVA溶液中，混合后，在37℃下孵育2 h，得到氢氧化铝矿化的蛋白溶液；

（3）水包油乳液制备：

取2 mL角鲨烯加入到步骤（2）得到的蛋白溶液中，采用超声破碎乳化的方法，制备得到抗原热稳定乳液；

所述超声功率为25%，超声时间为2 min。

2.一种制备抗原热稳定乳液的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）采用模版法制备中空磷酸钙颗粒：

将3.0 g 吐温80、0.25 g PEG 6000、3.0 mLpH为8，浓度为 0.5mol/L的Tris-HCl和1.5mL去离子水混合搅拌，然后超声20 min形成非离子表面活性剂囊泡，再滴入3.55 mL 0.175mol/L的 CaCl₂溶液，搅拌0.5 h后，加入3.55 mL 0.175 mol/L的 Na₂HPO₄溶液，得到磷酸钠颗粒的悬浮液，向悬浮液中加入0.83 mL 0.075 mmol/L 的MgCl₂溶液，搅拌2 h，离心洗涤，真空干燥后得到中空磷酸钙颗粒；

（2）蛋白质的仿生矿化：

取1.00 g步骤（1）得到的中空磷酸钙颗粒，加入到20 mL柠檬酸缓冲溶液中，超声2min，得到分散有磷酸钙颗粒的水相悬浮液，其中水相pH值为7.5，将悬浮液加入到浓度为1mg/mL 的OVA溶液中，混合后，在37℃孵育下2 h，得到中空磷酸钙矿化的蛋白溶液；

（3）水包油乳液制备：

取2 mL角鲨烯加入到步骤（2）得到的蛋白溶液中，采用磁力搅拌乳化的方法，制备得到抗原热稳定乳液；

所述磁力搅拌的转速为500 rpm，时间为10 min。

3.一种制备抗原热稳定乳液的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）采用液相直接混合沉淀法制备花生状的碳酸钙颗粒：

将醋酸钙和柠檬酸三钠溶解在200 mL蒸馏水中，向该溶液中加入50 mL 10 wt.%的碳酸钠水溶液，在300 rpm下搅拌反应3 h，过滤，用蒸馏水和无水乙醇分别洗涤沉淀三次，在70℃下烘干，得到花生状的碳酸钙颗粒；

（2）蛋白质的仿生矿化：

取3.1 g步骤（1）得到的碳酸钙颗粒，加入到40 mL磷酸盐缓冲溶液中，超声2 min使其分散，得到分散有碳酸钙颗粒的水相悬浮液，其中水相pH值为7.5，将该悬浮液加入到1 mg/mL OVA溶液中，混合后，在37℃下孵育2 h，得到碳酸钙矿化的蛋白溶液；

（3）水包油乳液制备：

取2 mL角鲨烯加入到步骤（2）得到的蛋白溶液中，采用快速膜乳化方法，制备得到抗原热稳定乳液；

所述膜为Shirasu Porous Glass，所述膜孔径为50.2 µm，过膜压力为200 KPa，过膜次数为三次。