[发明专利]一种高稳定性甲鱼油的制备方法及检测方法

权利要求书

1.一种高稳定性甲鱼油的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

①粉碎：取甲鱼脂肪，充分粉粹，得A品；

②冻结：将A品置于模具盒中，在-20℃下冷冻10小时，冻结成多个小块，得B品；

③二次粉碎：将B品置于研磨机中充分粉碎，得C品；

④自然解冻：将C品自然解冻至室温，得D品；

⑤加酶：将D品混入中性蛋白酶水溶液中，搅拌均匀，得E品；

⑥氮气升温：将E品置入细口容器中，并向E品通入高温氮气，对E品进行升温，得F品；

⑦超声处理:对F品进行超声处理，得G品；

⑧离心：对G品进行超声处理，取离心的上层液，得H品；

⑨调制：在H品种加入脂溶性茶多酚、维生素E和脂溶性迷迭香提取物的混合物，搅拌均匀，即可。

2.根据权利要求1所述的高稳定性甲鱼油的制备方法，其特征在于：所述步骤②中，每个冻结的小块的体积在3375mm³～5832mm³。

3.根据权利要求1所述的高稳定性甲鱼油的制备方法，其特征在于，所述步骤⑤中的中性蛋白酶水溶液的浓度为7～9g/mL，且每千克D品混入中性蛋白酶水溶液1.4～1.6L。

4.根据权利要求1所述的高稳定性甲鱼油的制备方法，其特征在于：所步骤⑥中，通入的高温氮气温度为65～70℃；高温氮气通入方式是，在细口容器底部设置散气石，高温氮气输入管道连通至散气石，高温氮气以气泡形式上浮，在与E品进行热交换的同时搅动E品，使E品升温至60℃，然后调低高温氮气通入速度，使E品维持在60±2℃下2.5小时。

5.根据权利要求1所述的高稳定性甲鱼油的制备方法，其特征在于：所步骤⑦中，超声处理的超声频率为53Hz，超声功率为350W，超声处理时间为15min，超声处理时，F品温度控制在60±2℃。

6.根据权利要求1所述的高稳定性甲鱼油的制备方法，其特征在于：所步骤⑧中，离心转速为4500r/min，离心时间为15min。

7.根据权利要求1所述的高稳定性甲鱼油的制备方法，其特征在于：所步骤⑨中，脂溶性茶多酚、维生素E和脂溶性迷迭香提取物的混合物的质量比为1:1.5:8；脂溶性茶多酚、维生素E和脂溶性迷迭香提取物的混合物的添加量为，每千克H品添加4克。

8.根据权利要求1至7任一权利要求所述方法制得的高稳定性甲鱼油的检测方法，其特征在于：称取0.1g甲鱼油样品于具塞试管中，加入2ml 0.5mol/L的NaOH-CH₃OH溶液，充分摇匀，65℃水浴加热30min，取出后自然冷却，再加入2ml 15％BF₃-CH₃OH溶液，充分摇匀，65℃水浴加热3min，取出后自然冷却，加入2ml正己烷提取，同时加入2ml饱和NaCl溶液水洗，静止分层，取上层清液并加入1/10体积的无水Na₂SO₄去除溶液中痕量的水，将处理好的上层清液过有机相滤膜后用气相色谱仪进行脂肪酸相对含量测定；其中气相色谱的检测条件为：HP-88氰丙基色谱柱(30m×0.25mm,0.20μm)；载气：H₂；不分流进样；进样量1μl；检测温度220℃；程序升温：起始柱温设定为70℃，以15℃/min升至120℃，保持1min，再以5℃/min升至175℃，保持10min；最后以5℃/min升至220℃，保持5min。

9.根据权利要求所述的高稳定性甲鱼油的检测方法，其特征在于，还包括挥发性风味化合物测定，其具体方法是：称取3g甲鱼油样品置于15ml顶空进样瓶中，60℃下平衡10min，并将老化好的50/30μm二乙烯基苯/碳分子筛/聚二甲基硅氧烷(DVB/CAR/PDMS)涂层萃取头插入进样瓶顶空部分，60℃下吸附30min，取出后插入GC-MS进样口，250℃解吸3min；

其中GC条件：色谱柱为TR-35MS(30m×0.25mm,0.25μm)；载气：高纯氦气；进样口温度250℃，不分流进样；升温程序：初始温度40℃，保持3min，以5℃/min升至90℃，再以10℃/min升至230℃，保持7min；

MS条件：离子源温度200℃；电子离子源；电子能量70eV；传输线温度250℃；检测器温度280℃；质量扫描范围m/z 30-500；

通过NIST 2.0谱库做自动检索确认分析，且仅当正反匹配度(SI/RSI)均大于800(最大值为1000)的鉴定结果才予以保留；再采用峰面积归一化法求得各挥发性成分在样品中的相对百分含量。