[发明专利]利用InDel标记鉴定柑橘柚杂交子代的试剂盒及方法

权利要求书

1.一种利用InDel标记鉴定柑橘柚类植物杂交子代的试剂盒，其特征在于，包括17个引物对，所述17个引物对的序列如SEQ ID NO:1和2、SEQ ID NO:3和4、SEQ ID NO:5和6、SEQID NO:7和8、SEQ ID NO:9和10、SEQ ID NO:11和12、SEQ ID NO:13和14、SEQ ID NO:15和16、SEQ ID NO:17和18、SEQ ID NO:19和20、SEQ ID NO:21和22、SEQ ID NO:23和24、SEQ IDNO:25和26、SEQ ID NO:27和28、SEQ ID NO:29和30、SEQ ID NO:31和32、SEQ ID NO:33和34所示。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包括用于PCR的其他试剂。

3.一种利用InDel标记鉴定柑橘柚类植物杂交子代的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：获得待鉴定的柑橘柚类植物子代的基因组DNA，以及预期的父本和 母本的基因组DNA；

S2：使用17个引物对分别扩增待鉴定的柑橘柚类植物子代的基因组DNA以及预期的父本和母本的基因组DNA中相应的InDel标记，所述17个引物对的序列如SEQ ID NO:1和2、SEQID NO:3和4、SEQ ID NO:5和6、SEQ ID NO:7和8、SEQ ID NO:9和10、SEQ ID NO:11和12、SEQID NO:13和14、SEQ ID NO:15和16、SEQ ID NO:17和18、SEQ ID NO:19和20、SEQ ID NO:21和22、SEQ ID NO:23和24、SEQ ID NO:25和26、SEQ ID NO:27和28、SEQ ID NO:29和30、SEQID NO:31和32、SEQ ID NO:33和34所示；

S3：将S2中的PCR扩增产物进行琼脂糖电泳，根据电泳带型判定待鉴定的柑橘柚类植物交子杂代是否是所述预期父本和母本杂交而得的杂交子代。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述预期的父本和母本为高班柚、晚白柚、HB柚、水晶蜜柚、缅甸柚、琯溪蜜柚、云南无酸柚、桂 林沙田柚、桂林酸柚中的任意两种组合。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，S2中扩增使用的PCR循环的退火温度为55℃，延伸时间为 1 min。